AIM: The work aimed to determine the possibility of using zinc-formalin fixation instead of Zenker-formol to identify selectively all the main types of cells (A, B, D) of the pancreatic Langerhans islets by staining using classical histochemical methods.
MATERIALS AND METHODS: Pancreatic samples of the naked mole rat (Heterocephalus glaber, Rüppell, 1842) were fixed for 24 hours in zinc-formalin fixative containing 300 ml of 37% formaldehyde, 50 g of zinc chloride, 1.9 ml of glacial acetic acid, and 2 L of distilled water. After fixation, the standard procedures for paraffin embedding and staining with Heidenhain’s azan and a combination of azan and Gomori’s paraldehyde-fuchsin were performed according to routine protocols.
RESULTS: It was revealed that a distinctive differential staining of all three major types of islet cells can be obtained if pancreatic samples are fixed in a zinc-formalin fixative for 24 hours. At the same time, as after fixation with Zenker-formol (but not with formalin solution or Bouin fixative), not only A and B, but also D-cells are clearly identified. Comparison of the immunohistochemical data on the distribution pattern of various cells in the pancreatic islet in a naked mole rat with that detected by histochemical stains showed their complete coincidence.
CONCLUSIONS: Zinc-formalin can be used as a more convenient and safer fixative for detecting Langerhans islet cells (including D cells) by staining with Heidenhain’s azan and Gomori’s paraldehyde-fuchsin instead of mercury salt-containing Zenker-formol.
Цель. Установить возможность использования фиксации цинк-формалином вместо ценкер-формола для избирательного выявления всех основных типов клеток островков Лангерганса поджелудочной железы (А, B, D) с помощью окраски классическими гистохимическими методами, направленными на выявление этих клеток.
Материал и методы. Образцы поджелудочной железы голого землекопа (Heterocephalus glaber, Rüppell, 1842) были зафиксированы в течение суток в цинк-формалиновом фиксаторе следующего состава: 37% формальдегид – 300 мл, хлорид цинка – 50 г, ледяная уксусная кислота – 1,9 мл, дистиллированная вода – 2 л. После фиксации следовала стандартная процедура заливки в парафин и окраски азаном Гейденгайна и комбинацией азана и паральдегид-фуксина Гомори по рутинным протоколам.
Результаты. Обнаружено, что отчётливую дифференциальную окраску всех 3 мажорных типов островковых клеток можно получить, если зафиксировать образцы поджелудочной железы в течение суток в цинк-формалиновом фиксаторе. При этом, как и после фиксации ценкер-формолом (но не формалином или жидкостью Буэна), отчётливо выявляются не только А и В, но и D-клетки. Сопоставление с иммуногистохимическими данными картины распределения различных клеток в островке голого землекопа, выявленной гистохимическими окрасками показало их полное совпадение.
Выводы. Цинк-формалин может быть использован как более удобный и безопасный фиксатор для выявления клеток островков Лангерганса (в том числе и D-клеток) с помощью окрасок азаном Гейденгайна и паральдегид-фуксином по Гомори вместо содержащего соль ртути ценкер-формола.