Обоснование. Разработка эффективных способов лечения сахарного диабета напрямую зависит от полноты представлений о механизмах дифференцировки эндокринных клеток и морфогенеза островков поджелудочной железы. В экспериментальных работах показано, что важную роль в регуляции этих процессов играет нервная система. В развивающейся поджелудочной железе человека структуры нервной системы тесно взаимодействуют с гормоносодержащими клетками, образуя нейроинсулярные комплексы, а также с эпителиальными клетками, что свидетельствует о возможном участии нервной системы в развитии панкреатических островков. Для подтверждения этой гипотезы крайне важны данные о взаимодействиях структур нервной системы с клетками, обладающими прогениторным иммунофенотипом, которые в современной литературе отсутствуют.

Цель исследования — изучить распределение клеток, содержащих фактор транскрипции PDX1, и бигормональных клеток в составе нейроинсулярных комплексов при развитии поджелудочной железы у человека.

Методы. Исследование выполнено на аутопсийном материале поджелудочной железы 15 плодов (гестационный возраст 9–25 недель) с использованием методов множественного иммунофлуоресцентного окрашивания и конфокальной микроскопии. Для оценки клеточного состава нейроинсулярных комплексов применяли антитела в различных комбинациях: к гормонам эндокринных клеток — инсулину, глюкагону, соматостатину; к фактору транскрипции PDX1 (Pancreatic and duodenal homeobox 1); к маркеру нервной системы — нейрон-специфическому β3-тубулину.

Результаты. При тройном иммунофлуоресцентном окрашивания антителами к инсулину, PDX1 и β3-тубулину в нейроинсулярных комплексах обнаружены клетки с прогениторным иммунофенотипом, характерным для эпителиоцитов протоков — инсулин⁻/PDX1⁺/β3-тубулин⁻ и инсулин⁻/PDX1⁺/β3-тубулин⁺. Начиная с 9-й недели внутриутробного развития такие клетки присутствовали в отдельно расположенных ганглиях, а с 14-й недели — и в ганглиях, интегрированных с панкреатическими островками в нейроинсулярные комплексы. На препаратах, окрашенных комбинациями антител инсулин/глюкагон/β3-тубулин и инсулин/соматостатин/β3-тубулин, в нейроинсулярных комплексах выявлены бигормональные инсулин⁺/глюкагон⁺ и инсулин⁺/соматостатин⁺ клетки.

Заключение. В результате проведённого исследования в развивающейся поджелудочной железе человека обнаружена пространственная интеграция структур нервной системы с клетками, обладающими прогениторным иммунофенотипом, и бигормональными клетками, которые рассматриваются большинством авторов как эндокринные клетки на стадии дифференцировки и созревания. Можно предположить, что такая интеграция необходима для регуляции массы β-клеток и их созревания, а также для модуляции морфогенеза островков поджелудочной железы, что показано в экспериментальных работах на животных и культурах клеток.

论证。开发有效的糖尿病治疗方法直接取决于对内分泌细胞分化机制和胰岛形态发生机制的全面了解。实验研究表明，神经系统在调节这些过程中起着重要作用。在发育中的人类胰腺中，神经系统的结构与含激素细胞密切相互作用，形成神经岛复合体，并与上皮细胞相互作用，这表明神经系统可能参与胰岛的发育。为证实这一假设，关于神经系统结构与具有祖细胞免疫表型的细胞之间相互作用的数据至关重要，而此类数据在现有文献中尚属空白。

目的。本研究旨在调查人类胰腺发育过程中含有转录因子PDX1的细胞和双激素细胞在神经岛复合体内的分布。

方法。本研究采用多重免疫荧光染色和共聚焦显微镜技术，对15例胎儿（胎龄9-25周）的尸检胰腺组织进行分析。为评估神经岛复合体的细胞组成，使用了多种抗体组合：针对内分泌细胞激素（胰岛素、胰高血糖素、生长抑素）的抗体；针对转录因子PDX1（胰腺和十二指肠同源框1）的抗体；以及针对神经系统标志物 — — 神经元特异性β3-微管蛋白的抗体。

结果。使用胰岛素、PDX1 和 β3-微管蛋白抗体进行三重免疫荧光染色显示，存在具有导管上皮细胞特征性祖细胞免疫表型的细胞：胰岛素阴性/PDX1阳性/β3-微管蛋白阴性 和 胰岛素阴性/PDX1阳性/β3-微管蛋白阳性。从宫内发育第9周起，此类细胞存在于孤立的神经节中；从第14周起，也存在于与胰岛整合形成神经岛复合体的神经节中。在使用胰岛素/胰高血糖素/β3-微管蛋白和胰岛素/生长抑素/β3-微管蛋白抗体组合染色的标本中，神经岛复合体内检测到了胰岛素阳性/胰高血糖素阳性和胰岛素阳性/生长抑素阳性的双激素细胞。

结论。本研究发现，在发育中的人类胰腺中，神经系统结构与具有祖细胞免疫表型的细胞以及双激素细胞（被大多数学者认为是处于分化和成熟阶段的内分泌细胞）存在空间整合。可以推测，这种整合对于调节 β 细胞数量及其成熟，以及调控胰岛形态发生至关重要，后者已在动物实验和细胞培养中得到证实。