MOLECULARGENETIC ASSESSMENT OF OXYTOCIN EFFECT ON THE CORNEAL REGENERATION

Abstract

Full Text

Изучено влияние препарата «Окситоцин» на экспрессию гена Ki-67 при экспериментальной эрозии роговицы. Эксперимент выполнен на 6 беспородных кроликах массой 2,5±0,3 кг. У 1-йи 2-й групп выполнили эрозию роговицы, 3-я группа (2 кролика) была контрольной - без повреждения роговицы. Животным 1-й группы закапывали 0,3 % ципромед 3 раза в сутки, 2-й группы - с эрозией роговицы закапывали 0,3 % ципромед и раствор окситоцина 3 раза в сутки. Выведение животных из эксперимента и извлечение глазного яблока осуществляли через 4 и 8 сут под эфирным рауш-наркозом. Под микроскопом были взяты образцы переднего эпителия и собственного вещества. Выделено 18 образцов. мРНК выделяли с помощью реагента ExtractRNA методом фенол-хлороформной экстракции. Образцы осаждали абсолютным этанолом и дважды промывали 80 % этанолом. Обратную транскрипцию проводили с помощью обратной транскриптазы MMLV. Для real-time PCR использовали специфические праймеры (ген «домашнего хозяйства» β-ACTIN и целевой ген Ki-67). По данным real-time PCR уровень экспрессии изучаемых генов нормализовали относительно гена β-ACTIN. По предварительным данным, экспрессия гена Ki-67 на 4-е сутки была больше в образцах 1-й группы животных (1,25). На 8-е сутки экспрессия была больше в образцах 2-й группы животных (1,31). Таким образом, установлено позитивное влияние препарата «Окситоцин» на процессы регенерации роговицы, о чем свидетельствуют показатели экспрессии гена Ki-67 по сравнению с β-ACTIN.