Microstructure of living tissues

Abstract

Full Text

Исследование микроструктуры нативных тканей в виде биопсий или в составе живых организмов является принципиально новым этапом развития морфологии. Такие возможности заложены в конфокальной мультифотонной микроскопии, при которой используется возбуждающее лазерное излучение высокой интенсивности в инфракрасном диапазоне, с глубиной проникновения в ткань до 1,5 мм. Отклик ткани на возбуждающее излучение имеет меньшие длины волн. При этом происходят многофотонные процессы - двухфотонная флюоресценция и генерация второй оптической гармоники. В представленной работе использовался мультифотонный конфокальный микроскоп Nikon A1R MP+, в котором использовали длину волны возбуждения λexc=760 нм и одновременную регистрацию сигналов отклика в виде двухфотонной флуоресценции и второй гармоники в диапазоне длин волн 300<λ1<400 нм, 458<λ2<495 нм, 495<λ3<593 нм. При исследовании эпителиальной и соединительной ткани, включая жировую ткань, артериолы и капилляры человека и животных, показана их микроструктура, сопоставимая с данными светооптической и электронной (СЭМ и ТЭМ) микроскопией. Обнаруженные отличия, очевидно, являются «издержками» пробоподготовки (в значительной степени обезвоживания) вышеуказанных тканей при проведении исследования с помощью классических морфологических методов. Мультифотонная томография (послойное сканирование) на глубину 500 мкм позволила получить 3D реконструкцию исследованных тканей.