STANDARDIZATION OF IMMUNOHISTOCHEMICAL DETERMINATION OF THE LEVEL OF KI67 EXPRESSION IN THE CELLS OF VARIOUS TISSUES

详细

全文:

Одним из маркеров, позволяющих оценивать с помощью иммуногистохимического метода состояние процессов пролиферации в тканях является ядерный белок Ki-67. Установлено, что экспрессия Ki-67 меняется в пределах всего клеточного цикла. Уровень содержания белка в G0 и G1 периодах клеточного цикла низкий, начинает увеличиваться в S-фазе и возрастает до максимума к митозу. В анафазе и телофазе экспрессия Ki-67 значительно снижается. Таким образом, белок является достаточно точным маркером, отражающим не только состояние пролиферации в клеточной популяции в целом, но и может использоваться для оценки распределения клеток по фазам клеточного цикла. Однако единой методики проведения иммуногистохимического определения и оценки уровней экспрессии Ki-67 в клетках тканей нет, что приводит к существенным различиям в оценке этого показателя в разных гистологических лабораториях. Это связано с различием клонов используемых антител, методик проведения иммуногистохимического исследования, способов оценки и определения уровня экспрессии. Основную роль играет отсутствие протокола стандартизованной процедуры выявления Ki-67, что существенно ухудшает объективность и воспроизводимость этого исследования. Необходимо придерживаться определенных правил оценки уровня пролиферации ткани по экспрессии Ki-67: учитывать только ядерное окрашивание (без учета его интенсивности и особенностей прокрашивания ядер анализируемых клеток); подсчет должен включать не менее 1000 клеток; микроскопия должна проводиться при использовании увеличения микроскопа 400. При равномерном диффузном распределении окрашенных клеток в ткани исследование должно проводиться в нескольких случайно выбранных полях зрения среза; в случае наличия генеративных зон в органе необходимо подсчитывать их отдельно, при этом выбирать в них участки с наибольшим уровнем экспрессии Ki-67. Следует стремиться к внедрению в гистологические лаборатории автоматизированных методов оценки показателя в отсканированном препарате. Так же следует проводить обучение специалистов, занимающихся количественным исследованием уровней экспрессии Ki-67.