Мембранные методы получения конъюгатов на основе пероксидазы хрена для определения вирусных инфекций
- Авторы: Шкинев В.М.1, Ларичев В.Ф.2, Трофимов Д.А.1
-
Учреждения:
- Институт геохимии и аналитической химии им. В.И. Вернадского РАН
- Национальный исследовательский центр эпидемиологии и микробиологии им. Н.Ф. Гамалеи Минздрава России
- Выпуск: Том 80, № 4 (2025)
- Страницы: 407-417
- Раздел: ОРИГИНАЛЬНЫЕ СТАТЬИ
- Статья получена: 05.06.2025
- URL: https://j-morphology.com/0044-4502/article/view/683047
- DOI: https://doi.org/10.31857/S0044450225040055
- EDN: https://elibrary.ru/akikvh
- ID: 683047
Цитировать
Аннотация
Предложен подход к использованию мембранной фильтрации в разработке методик получения конъюгатов на основе пероксидазы хрена для определения вирусных инфекций. Показано, что данный подход значительно проще, быстрее и дешевле, чем хроматографический. Практически отсутствуют потери конюгатов при очистке компонентов. Предложена методика мембранной очистки пероксидазы хрена и ее анализа методом капиллярного электрофореза. Методика также позволяет приготовить конъюгат пироксидазы хрена и антигена вируса для использования в иммуноферментном анализе (ИФА) для выявления антител класса М к вирусу (в модификации захвата М антител). Описана практика использования разнообразных диагностических наборов, приготовленных с использованием данного подхода, например в ИФА тест-системах, для диагностики заболеваний, вызванных вирусами Западного Нила, Крымской-Конго геморрагической лихорадки, клещевого энцефалита и т.д.
Полный текст

Об авторах
В. М. Шкинев
Институт геохимии и аналитической химии им. В.И. Вернадского РАН
Автор, ответственный за переписку.
Email: vshkinev@mail.ru
Россия, ул. Косыгина, 19, Москва, 119991
В. Ф. Ларичев
Национальный исследовательский центр эпидемиологии и микробиологии им. Н.Ф. Гамалеи Минздрава России
Email: vlaritchev@mail.ru
Россия, ул. Гамалеи, 18, Москва, 123098
Д. А. Трофимов
Институт геохимии и аналитической химии им. В.И. Вернадского РАН
Email: vshkinev@mail.ru
Россия, ул. Косыгина, 19, Москва, 119991
Список литературы
- Шеховцова Т.Н., Веселова И.А., Мугинова С.В. Ферментативные методы анализа: новые подходы и области применения // Известия АН наук. Серия химическая. 2007. № 4. С. 583. (Shekhovtsova T.N., Muginova S.V., Veselova I.A. Enzymatic methods of analysis: Novel approaches and applications // Russ. Chem. Bull. 2007. Т. 56. № 4. Р. 606.)
- Ahmad M.S., Shah N., Akbar Z., Khan T., Ali A. Simple two-step purification and characterization of peroxidase from Citrullus colocynthis // Nat. Prod. Res. 2024. V. 38. № 19. P. 3374.
- Кропанева М.Д., Храмцов П.В., Бочкова М.С., Раев М.Б. Разработка модельного иммунофильтрационного анализа с использованием конъюгата на основе пероксидазы хрена // Российский иммунологический журнал. 2023. Т. 26. № 3. С. 313.
- Nakane P.K., Kawaoi A. Peroxidase-labeled antibody a new method of conjugation // J. Histochem. Cytochem. 1974. V. 22. № 12. P. 1084.
- Николаевa К.Г., Ермаков С.С., Ермоленко Ю.Е., Наволоцкая Д.В., Оффенхойзерc А., Мурзинаc Ю.Г. Биосенсоры на основе пероксидазы хрена с различными типами нанотрансдъюсеров для определения пероксида водорода |// Журн. аналит. химии. 2021. Т. 76. № 4. С. 350. (Nikolaev K.G., Ermakov S.S., Ermolenko Y.E., Navolotskaya D.V., Offenhäusser A., Mourzina Y.G. Horseradish peroxidase-based biosensors with different nanotransducers for the determination of hydrogen peroxide // J. Anal. Chem. 2021. Т. 76. № 4. Р. 510.)
- Гребенникова О.В., Сульман А.М., Шиманская Е.И., Филатова А.Е. Синтез биокаталитических систем с использованием пероксидазы корня хрена // Вестн. Тверского гос. ун-та. Сер. Химия. Физическая химия. 2022. № 2 (48). С. 7.
- Иммунологические методы / Под ред. Г. Фримеля. 1987. М.: Медицина, 1987. С. 436.
- Иммуноферментный анализ / Под ред. Т.Г. Нго, Г. Ленхоффа. М.: Мир, 1988. С. 174.
- Колясников О.В., Григоренко В.Г., Егоров А.М., Lange S., Schmid R.D. Получение рекомбинантного конъюгата пероксидазы хрена с Fab фрагментом антител с использованием экспрессионной системы Pichia pastoris // Acta Naturae. 2011. Т. 3. № 3 (10). С. 88.
- Григоренко В.Г., Андреева И.П., Рубцова М.Ю., Егоров А.М. Рекомбинантная пероксидаза хрена: получение и использование в аналитических целях // Биохимия. 2015. Т. 80. № 4. С. 480.
- Медянцева Э.П., Бейлинсон Р.М., Николаенко А.И., Будников Г.К. Пероксидаза хрена – аналитические возможности при определении зеараленона // Журн. аналит. химии. 2022. Т. 77. № 6. С. 522. (Medyantseva E.P., Beilinson R.M., Nikolaenko A.I., Budnikov H.C. Horseradish peroxidase: Analytical capabilities in the determination of zearalenone // J. Anal. Chem. 2022. Т. 77. № 6. Р. 671.)
- Трусова И.Н. Дис. … канд. биол. наук. Москва: Научно-исследовательский институт вирусологии им. Д.И. Ивановского, 2013.
- Мембраны, фильтрующие элементы, мембранные технологии: каталог. Владимир: ЗАО НТЦ “Владипор”.
- Твердофазный иммуноферментный метод (ТИФМ, ELISA) / Методические рекомендации. Организация эколого-эпидемиологического мониторинга территории Российской Федерации с целью противоэпидемической защиты населения и войск / Под ред. Д.К. Львова. М., 1995. С. 71.
- Calisher C.H., Petzman C.I., Muyh D.J., Parsons M.A. Serodiagnosis of La Cross Virus infections in humans by detections of immunoglobulin M class antibodies // J. Clin. Microbiol. 1986. V. 23. P. 667.
- Ларичев В.Ф., Козлова А.А., Сайфуллин М.А., Хуторецкая Н.В., Шкинев В.М., Бутенко А.М. Иммуноферментные тест-системы для диагностики эндемичных для России и завозных тропических арбовирусных инфекций // Эпидемиология и инфекционные болезни. Вирусные и тропические заболевания. 2015. Т. 20. № 6. С. 44.
Дополнительные файлы
