THE EXPRESSION LEVEL OF MIR-181A IN THE SERUM OF AN EXPERIMENTAL ANIMALS IN AUTOIMMUNE OOPHORITIS

Abstract

Full Text

Цель - изучить уровень экспрессии miR-181a в сыворотке крови крыс (n=25) с моделью аутоиммунного оофорита (патент № 2439712 от 10.01.2012 г.), как маркера овариального резерва. Контроль - 10 интактных крыс. Выводили из эксперимента на 5-, 10-, 15-, 30-еи 60-е сутки. Для оценки морфологических изменений проводили морфометрию с подсчетом среднего содержания фолликулов, желтых тел, атретических тел в срезе яичника в 10 полях зрения. МикроРНК выделяли с использованием набора mirVana™ (Ambion, USA) по стандартному протоколу. Количество микроРНК и чистоту выделения оценивали на спектрофотометре NanoDrop 2000 (Thermo-Scientific, USA). Обратную транскрипцию и ПЦР в режиме реального времени проводили с помощью специфических праймеров БиоМастер ОТ-ПЦР-РВ (Биолабмикс, Россия). Расчет относительной экспрессии miR-181a проводили методом Pfaffle. Для оценки значимости различий применен непараметрический метод (U-критерий Манна- Уитни) (SPSS®22.0). Значимое увеличение экспрессии miR-181a определено на 15-е сутки эксперимента [3,44 (1,47-5,18) при 0,20 (0,04-0,77) в контроле, p≤0,05] и коррелирует со значимым сокращением количества растущих фолликулов в срезах яичников [1,5 (1,13- 2,0), при 3,45 (3,33-4,0) в контроле, p≤0,05]. По мнению Q. Zhang и соавт. (2013), miR-181а может ингибировать пролиферацию клеток гранулезы и развитие фолликулов в яичниках на посттранскрипционном уровне. Таким образом, miR-181a можно рассматривать как маркер фолликулярного роста, что требует клинической оценки в репродуктивных программах.