ESTROGEN RECEPTOR ALPHA MRNA ALTERNATIVE SPLICING IN THE HUMAN BRAIN IN AGING AND IN ALZHEIMER’S DISEASE: MOLECULAR BIOLOGICAL AND IMMUNOCYTOCHEMICAL STUDY

Abstract

Full Text

Процесс старения головного мозга и патогенез болезни Альцгеймера (БА) всё чаще связывают с дисбалансом альтернативного сплайсинга (АС) и нарушениями его регуляции. Учитывая данные литературы отом, что дефицит эстрогенов увеличивает риск деменции, целью настоящей работы стало изучение особенностей АС мРНК эстрогенового рецептора альфа (ЭРα) в головном мозгу человека при старении и БА. Молекулярно-биологическое исследование проведено на материале 305 образцов различных структур головного мозга пациентов с БА и контрольных случаев и предусматривало проведение качественной и количественной ПЦР с последующим определением нуклеотидной последовательности полученных продуктов. Иммуноцитохимическое окрашивание двух новых сплайсинговых вариантов проведено на парафиновых срезах гипоталамуса и гиппокампа 94 случаев в возрасте от 20 до 94 лет, включая 30 пациентов с БА, с помощью поликлональных антител, распознающих специфичные сплайсинговые сайты. При нормальном старении наблюдалось увеличение экспрессии классической мРНК ЭРα и основного сплайсингового варианта головного мозга с делецией 7-го экзона. Иммуноцитохимическая экспрессия двух изученных вариантов ЭРα значимо увеличивалась у женщин после менопаузы. При БА выявлено снижение разнообразия и уровня экспрессии сплайсинговых вариантов ЭРα. Полученные результаты свидетельствуют о накоплении в мозгу у женщин после менопаузы вариантов ЭРα с повреждениями домена для связи с лигандами, что предполагает изменения сигнальной функции эстрогенов. Выявленные нарушения АС мРНК ЭРα при старении и БА необходимо учитывать при оценке эффектов эстрогенов, назначаемых с лечебно-профилактической целью.