STIMULATING EFFECT OF BLOOD MONONUCLEAR LEUKOCYTES AND CaP-COATED IMPLANTS ON THE IN VITRO DIFFERENTIATION OF MESENCHYMAL STEM CELLS INTO OSTEOBLASTS

Abstract

Full Text

Цель исследования - оценить влияние мононуклеарных лейкоцитов в крови (МНК) на остеогенную дифференцировку мультипотентных мезенхимных стволовых клеток (МСК) при контакте с имплантатами с кальцийфосфатным (СаР) покрытием in vitro. Из липоаспирата и крови здоровых доноров выделяли МСК и аллогенные МНК соответственно. Эксперимент состоял из 4 серий (по 3 лунки на каждую): 1-я - МСК без имплантата; 2-я - МСК с имплантатом; 3-я - МСК+МНК без имплантата; 4-я - МСК+МНК с имплантатом. В течение 21 сут клетки культивировали в полной питательной среде без добавок, фиксировали в парах формалина и окрашивали ализариновым красным, подсчитывали площадь и количество участков минерализации матрикса. В 1-й серии большую часть лунки занимал слабо окрашенный ализариновым красным монослой клеток, что свидетельствует об отсутствии значительной остеогенной дифференцировки МСК. Во 2-й серии при культивировании МСК вокруг имплантатов, покрытых CaP, отмечались отдельные мелкие участки минерализации. Добавление МНК в культуру МСК в 3-й серии значительно увеличивало число и общую площадь участков минерализации. Однако наиболее значимо число и общая площадь участков минерализации возрастали в 4-й серии при культивировании МСК и МНК с имплантатом (в 6 и 10 раз соответственно). Таким образом, показано синергичное стимулирующее действие МНК и имплантатов с CaP на остеогенную дифференцировку МСК, которое может быть тесно связано с механизмами трансплантационного иммунитета.