VOLTAGE-DEPENDENT ANION CHANNEL PROMOTE MITOPHAGY TO PROTECT NEURON FROM DEATH IN AN EARLY BRAIN INJURY FOLLOWING A SUBARACHNOID HEMORRHAGE IN RATS

Abstract

Full Text

Изучали роль митофагии - избирательного удаления митохондрий с помощью аутофагии - через 48 ч после субарахноидального кровоизлияния (САК) у крыс. Специально оценивали способность митофагии через потенциал-зависимые анионные каналы (ПЗАК) взаимодействующие с легкой цепью 3 (ЛЦ3) связанного с микротрубочками белка 1, управлять индукцией апоптотической и некротической клеточной гибели в нейронах. Были использованы ПЗАК1siRNA и активатор рапамицин (РМ). 112 самцов крыс линии Sprague-Dawley были разделены на 4 группы: ложнооперированные, САК, САК+ПЗАК1siRNА и САК+РМ. Измеряемые параметры включали уровень смертности, выраженность отека мозга, нарушение гематоэнцефалического барьера и поведенческие тесты. Использовали также метод Вестерн-блоттинга для измерения экспрессии ключевых белков митофагии/аутофагии и проапоптотических белков, таких как реактивные метаболиты кислорода (РМК), ПЗАК1, ЛЦ-3 и каспаза-3. РМ значительно уменьшает уровень смертности, отек мозга, дефицит поведения, и, как показало гистологическое исследование после САК, гибель нейронов вследствие апоптоза и некроза. Однако ПЗАКsiRNA усугубляет повреждение мозга при САК. Иммуногистохимические реакции и Вестерн-блоттинг выявили повышенную экспрессию ПЗАК1, ЛЦ3, и уменьшение активности РМК и каспазы-3 после введения РМ. Таким образом, митофагия после повреждения при САК играет значительную роль в нейропротекции, причем ее участие может быть опосредовано угнетением молекулярных механизмов апоптоза и некроза.