SIMULTANEOUS DEMONSTRATION OF GLUTAMATE DECARBOXYLASE AND SYNAPTOPHYSIN IN PARAFFIN SECTIONS OF RAT CEREBELLUM
- Authors: Korzhevskiy D.E.1,2, Gilerovich Y.G.1, Kirik O.V.1, Alekseyeva O.S.1,3, Grigoriyev I.P.1
-
Affiliations:
- RAS North-Western Branch Institute of Experimental Medicine
- St. Petersburg State University
- RAS I. M. Sechenov Institute of Evolutionary Physiology and Biochemistry
- Issue: Vol 147, No 1 (2015)
- Pages: 74-77
- Section: Articles
- URL: https://j-morphology.com/1026-3543/article/view/398836
- DOI: https://doi.org/10.17816/morph.398836
- ID: 398836
Cite item
Abstract
The article presents highly reproducible and inexpensive protocol for simultaneous demonstration of glutamate decarboxylase (GAD67), the key enzyme of gamma-aminobutyric acid (GABA) synthesis and synaptophysin (SYP), a marker protein of synaptic vesicles using confocal laser microscopy. In the cerebellar cortex, GAD labels Purkinje cells and pinceaux in their basal parts and is unevenly distributed in the neuropil of molecular and granular layers. SYP clearly marks the contours of large dendrites of Purkinje cells in molecular layer, while in the granular layers it labels parts of cerebellar glomeruli - the terminals of the mossy fibers. GAD-immunopositive structures (GABA-ergic axons of stellate cells - Golgi cells) are often located at periphery of the glomeruli. In the peripheral zone of the glomeruli, colocalization of GAD- and SYP-immunopositive structures was observed, suggesting the presence of GABA-ergic synapses in this zone.
Full Text
About the authors
D. E. Korzhevskiy
RAS North-Western Branch Institute of Experimental Medicine; St. Petersburg State University
Email: iemmorphol@yandex.ru
Ye. G. Gilerovich
RAS North-Western Branch Institute of Experimental Medicine
O. V. Kirik
RAS North-Western Branch Institute of Experimental Medicine
O. S. Alekseyeva
RAS North-Western Branch Institute of Experimental Medicine; RAS I. M. Sechenov Institute of Evolutionary Physiology and Biochemistry
I. P. Grigoriyev
RAS North-Western Branch Institute of Experimental Medicine
References
- Гилерович Е. Г. Иммуногистохимическое изучение структурных основ торможения в центральных ядрах мозжечка у мышей // Рос. физиол. журн. им. И. М. Сеченова. 1998. Т. 84, № 12. С. 1325-1332.
- Гилерович Е. Г., Мошонкина Т. Р., Федорова Е. А. и др. Морфофункциональная характеристика поясничного утолщения спинного мозга крысы // Морфология. 2007. Т. 132, вып. 5. С. 33-37.
- Гиляров А. В., Кирик О. В., Коржевский Д. Э. Сравнительный анализ методических подходов, применяемых для одновременного выявления нескольких антигенов при иммуногистохимическом исследовании // Морфология. 2010. Т. 138, вып. 5. С. 59-64.
- Коржевский Д. Э., Кирик О. В., Карпенко М. Н. и др. Теоретические основы и практическое применение методов иммуногистохимии. СПб.: СпецЛит, 2014.
- Коржевский Д. Э., Сухорукова Е. Г., Гилерович Е. Г. и др. Преимущества и недостатки цинк-этанол-формальдегида как фиксатора для иммуноцитохимических исследований и конфокальной лазерной микроскопии // Морфология. 2013. Т. 143, вып. 2. С. 81-85.
- Сухарева Б. С., Дарий Е. Л., Христофоров Р. Р. Глутаматдекарбоксилаза: структура и каталитические свойства // Успехи биол. химии. 2001. Т. 41. С. 131-162.
- Evans G. J., Cousin M. A. Tyrosine phosphorylation of synaptophysin in synaptic vesicle recycling // Biochem. Soc. Trans. 2005. Vol. 33 (Pt. 6). P. 1350-1353.
- Garin N., Escher G. The development of inhibitory synaptic specializations in mouse deep cerebellar nuclei // Neuroscience. 2001. Vol. 105. P. 431-441.
- Manto M., De Zeeuw C. I. Diversity and complexity of roles of granule cells in the cerebellar cortex // Cerebellum. 2012. Vol. 11. P. 1-4.