DEMONSTRATION OF PROTEASOMES IN U937 APOPTOTIC CELLS

Abstract

Full Text

Один из наиболее важных подходов к изучению протеасом связан с анализом их участия во многих клеточных процессах, например, их роли в апоптозе. Распространенной моделью для изучения механизмов апоптоза являются клетки культуры U-937, которые входят в состояние апоптоза при инкубации в гипертоническом растворе сахарозы. Структурные и иммуноцитохимические методы электронно-микроскопического анализа позволили нам сделать вывод, что появление агрегатов протеасом как в ядре, так и в цитоплазме клеток U-937 является характерным признаком апоптозных клеток. Протеасомы представляют собой палочковидные структуры толщиной 15-20, длиной 20-40 нм. На строго продольных срезах отдельных протеасом видна их периодическая структура, определяемая чередованием светлых и темных полос с периодом повторения порядка 10 нм. Для идентификации этих органелл была проведена иммуноцитохимическая реакция с использованием коллоидного золота. Показано, что агрегаты в ядре и цитоплазме клеток U-937, содержащие протеасомы, метятся антителами к субъединице белка протеасом α7. Прямое выявление протеасом на ультратонких срезах апоптозных клеток U937 представляется очень важным, так как до сих пор они не были визуализированы in situ.