Structural dynamics of dermal fibroblasts in the process of cultivation

Abstract

Full Text

Современные тенденции развития регенеративной медицины указывают на необходимость культивирования больших количеств аутологичного клеточного материала для использования в терапевтических целях. В связи с этим актуальной проблемой является изучение структурной динамики клеток в ходе культивирования. Исследование человеческих фибробластов дермы проводили методами световой и электронной микроскопии. В результате было выявлено изменение размера клеток в ходе культивирования: на момент первого пассажа (р1) клетки значимо (р≤0,05) увеличивались в размере в 1,5 раза по сравнению клетками нулевого (р0) пассажа. При дальнейшем пассировании (р1-р10) статистически значимого увеличения размера фибробластов не отмечалось. Изменение размера клеток, вероятно, связано с утратой ими связи с тканевым микроокружением после выделения из ткани и культивирования до первого пассажа. В процессе культивирования обращало на себя внимание появление многочисленных выпячиваний разного размера цитоплазматической мембраны и зон обводнения цитоплазмы, особенно выраженные на этапе открепления клеток от дна флакона при пересевах вне зависимости от числа пассажей. Эти изменения не приводили к гибели клеток, но, несомненно, указывали на стрессорное действие на них физических и химических факторов, сопровождающих процесс перехода клеток из распластанного состояния во взвешенное. Таким образом, при применении культивированных клеток для терапии необходимо учитывать, что обнаруженные изменения клеток in vitro могут существенно сказаться на их жизнеспособности и терапевтических свойствах уже в условиях in vivo.