Influence of dark deprivation on the ultrastructure and mitochondrial apparatus of rat hepatocytes

Cover Page


Cite item

Full Text

Abstract

BACKGROUND: Melatonin is a hormone with a wide range of biological activities. The diversity of biological regulatory effects inherent in MT involves this hormone in the formation of adaptive reactions and in the pathogenesis of various diseases. А decrease оf мelatonin secretion due to exposure to light at night is observed in a significant proportion of people. A number of previous studies have shown that melatonin deficiency, causes significant changes in the structure of the liver of laboratory animals. The state of ultrastructural features of hepatocytes, and in particular their mitochondria, under conditions of dark deprivation remains poorly understood.

AIM: To study the ultrastructural features of liver hepatocytes of male Wistar rats under conditions of 21-day dark deprivation.

MATERIALS AND METHODS: The study was performed on 40 male Wistar rats, divided into 2 groups: group 1 was kept under a fixed light regime; group 2 was kept under dark deprivation conditions for 24 h a day. Liver samples, were analyzed using a transmission electron microscope. Micromorphometric methods were used to assess the mitochondrial apparatus of hepatocytes. Statistical processing of the results was performed in the GraphPad Prism v. 8.4.1 program (GraphPad, USA).

RESULTS: In hepatocytes of rats of II group, dark deprivation causes a transformation in the shape of the nuclei, accompanied by swelling of the cytoplasm and the presence of a significant number of lipid-containing vacuoles. Mitochondria are characterized by pronounced hyperplasia, size polymorphism, high electron density, and disordered cristae orientation. In the cytoplasm, the phenomenon of shedding of ribosomes from the endoplasmic reticulum is observed. The number of glycogen granules is significantly reduced. The studied micromorphometric parameters of mitochondria are significantly reduced relative to the control.

CONCLUSIONS: The study suggests that melatonin deficiency, resulting from dark deprivation, leads to a number of significant ultrastructural changes in hepatocytes, especially their mitochondrial apparatus.

Full Text

ОБОСНОВАНИЕ

Мелатонин (Melatonin, N-acetyl-5-methoxytryptamine) — эндогенный индоламин, который синтезируется в большей части эпифизом. Он обладает широчайшим спектром биологической активности, которая включает в себя не только регуляцию биологических ритмов, но и синтез половых гормонов, стимуляцию функций иммунных клеток, цитостатические и антипролиферативные эффекты. Мелатонин является одной из важнейших эндогенных ловушек свободных радикалов, в некоторых случаях более эффективной, чем глутатион, аскорбиновая кислота и β-каротин. Он способен связывать высокотоксичные гидроксильные радикалы, анионы пероксинитрита, синглетный кислород, оксид азота (II) и радикал супероксидного аниона. Многообразие присущих мелатонину биологических регуляторных эффектов, а также его антиоксидантные свойства вовлекают этот гормон в формирование адаптационных реакций и в патогенез различных заболеваний, особенно ассоциированных с возрастной инволюцией органов и тканей.

В современных условиях понижение секреции мелатонина вследствие воздействия света в ночное время наблюдается практически у всего городского населения РФ; кроме того, порядка 20% трудоспособных граждан работают посменно, подвергаясь в рабочее время круглосуточному световому воздействию. Важно также, что значительная часть территории РФ находится в высоких широтах, где дополнительным фактором выступают климатогеографические факторы (белые ночи, полярные дни), а их действию подвергается всё постоянно живущее в этих условиях население и значительное число людей, работающих вахтовым методом или проходящих воинскую службу. Это особенно важно с учётом актуализации курса на освоение северных территорий РФ.

Доказана роль светового загрязнения в развитии злокачественных новообразований, сокращении продолжительности жизни, рассогласовании в работе антиоксидантной системы, изменении ряда других физиолого-биохимических показателей биологического возраста (например, «старении иммунитета»). Возникающий в результате дефицита мелатонина десинхроноз ассоциирован с рядом заболеваний сердечно-сосудистой системы, желудочно-кишечного тракта, эндокринной системы, в том числе с такими социально значимыми болезнями, как диабет 2-го типа, злокачественные новообразования.

Одной из важнейших биологических функций мелатонина является гепатопротекторная. При пинеалэктомии или в условиях длительной темновой депривации у крыс развивается фиброз печени [1]; при экспериментальных моделях фиброза и цирроза печени мелатонин снижает степень патологических изменений в органе, предположительно за счёт уменьшения выраженности окислительного стресса, а также наблюдается снижение темпов старения желчных протоков [2–4]. Одним из эффектов мелатонина является увеличение плоидности и доли двуядерных гепатоцитов [5, 6], а при пинеалэктомии наблюдается резкое снижение пролиферативной активности клеток печени после её частичной резекции [7]. Доказано, что пероральное введение мелатонина грызунам при высококалорийной диете вызывает ослабление стеатоза печени на фоне снижения уровня активности аминотрансфераз [8, 9].

В ряде ранее проведённых исследований показано, что дефицит мелатонина, возникающий при искусственном постоянном освещении, вызывает значительные изменения в структуре печени лабораторных животных, а также в величине и циркадной ритмичности ряда показателей, характеризующих морфофункциональную целостность этого органа.

Нам представлялось актуальным исследовать ультраструктурные особенности гепатоцитов, и в особенности их митохондрий, в условиях 21-суточной темновой депривации, поскольку дисфункция митохондрий играет важную роль в патогенезе многих заболеваний. В качестве одного из путей биотрансформации мелатонина рассматривают его окисление митохондриальным цитохромом С, а наиболее высокая внутриклеточная концентрация мелатонина обнаружена именно в этих органоидах [10–12].

Цель исследования — изучить ультраструктурные особенности гепатоцитов печени самцов крыс стока Вистар в условиях 21-суточной темновой депривации.

МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ

Проведено экспериментальное одноцентровое проспективное выборочное контролируемое рандомизированное исследование.

Работа выполнена на 40 самцах крыс аутбредного стока Вистар в возрасте 6 мес, массой тела 350±15 г. Животных получили из питомника ФГБУН НЦБМТ ФМБА России «Столбовая».

Все крысы содержались в пластиковых клетках при температуре 20–22 °С и относительной влажности воздуха 60–70%; первоначально животных содержали при естественном освещении. Крысы имели свободный доступ к питьевой воде и брикетированному корму ПК-120-1 (ООО «Лабораторснаб», сертификат соответствия № POCCRU.nO81.B00113, ГОСТ P50258-92). Исследование соответствовало Европейской конвенции о защите позвоночных животных, используемых для экспериментов или в других научных целях (Страсбург, 18 марта 1986 г.). На проведение исследования получено разрешение биоэтического комитета ФГБНУ НИИМЧ имени А.П. Авцына (протокол № 34(10) от 14.03.2021).

Крысы были случайным образом разделены на 2 группы:

  • 1-я группа (контроль, n=20) содержалась при фиксированном световом режиме (свет:темнота/10:14 ч с включением света в 8:00 и выключением в 18:00;
  • 2-я группа (экспериментальная, n=20) содержалась в условиях темновой депривации 24 ч в сутки.

Длительность эксперимента составляла 3 нед.

Выведение крыс из эксперимента осуществляли в углекислотной камере, оборудованной устройством для верхней подачи газа (100% СО2), в 9:00, 15:00, 21:00 и 3:00. Заполнение объёма камеры газом производили со скоростью 20% в минуту во избежание возникновения у животных диспноэ и боли. Под действием газа животные засыпали, после чего у них выполняли забор крови для определения среднесуточного уровня мелатонина; также осуществляли эвисцерацию печени.

Для количественного определения концентрации мелатонина в крови применяли иммуноферментный анализ с использованием набора реагентов ELISA Kit for Melatonin (MT) (Cloud-Clone Corp., Китай).

Образцы печени размером 2 мм3 фиксировали 2,5% раствором глутарового альдегида на фосфатном буфере (рН=7,4), затем дофиксировали в 1% растворе оксида осмия (OsO4), обезвоживали в этаноле, в процессе обезвоживания контрастировали 1% уранилацетатом на 70% этаноле и проводили заливку в смесь эпон–аралдит по стандартной методике [13].

Ультратонкие срезы, полученные на ультратоме LKB-III (LKB Produkter, Швеция), дополнительно контрастировали цитратом свинца по Рейнольдсу и просматривали в просвечивающем электронном микроскопе JEM-100CX (JEOL, Япония). Фотофиксацию препаратов осуществляли с помощью камеры Gatan ES500W Erlangshen (Model 782) (Gatan Inc., США).

Для микроморфометрической оценки митохондриального аппарата гепатоцитов в каждом препарате анализировали 20 непересекающихся полей зрения при ×20 000 и 10 полей зрения при ×50 000 (для расчёта концентрации внутренних мембран митохондрий, КВММ). С целью стандартизации результатов исследования на полутонких срезах, окрашенных толуидиновым синим, для анализа выбирали однотипные участки — промежуточную зону печёночных долек [14].

При помощи программы ImageJ определяли среднюю суммарную площадь сечений митохондрий на 100 мкм2 цитоплазмы, среднее количество митохондрий на 100 мкм2, среднюю площадь сечения одной митохондрии, средний периметр одной митохондрии, среднюю суммарную длину крист в 1 митохондрии, среднее количество крист в 1 митохондрии, среднюю длину 1 кристы митохондрии и КВММ, которую рассчитывали по формуле:

КВММ=(p+2l)n ,

где p — средний периметр митохондрии, l — средняя длина кристы в одной митохондрии, n — число митохондрий на единицу площади гепатоцита [15].

Методы статистической обработки

Построение графиков и статистическую обработку результатов выполняли в программе Prism v. 8.4.1 (GraphPad, США). Для выявления типа распределения использовали тест Д’Агостино–Пирсона. При нормальном распределении применяли t-тест Стьюдента для парного сравнения и тест Тьюки для сравнения трёх и более групп. Различия группы исследования с контрольной оценивали с помощью теста Даннета. При ненормальном распределении был использован тест Манна–Уитни для парного сравнения и тест Данна для сравнения трёх и более групп. Статистически значимыми считали различия при уровне значимости α или вероятности ошибки отклонения от нулевой гипотезы ниже 5% (p <0,05). При построении графиков и описании результатов исследования использовали среднее арифметическое и стандартное отклонение (M±m). Уровень значимости различий обозначали следующим образом: * соответствует p <0,05; ** означают p <0,005; *** обозначают p <0,0005.

РЕЗУЛЬТАТЫ

Проведённый иммуноферментный анализ свидетельствует о снижении среднесуточного содержания мелатонина в крови крыс экспериментальной группы до 7,12±0,50 пг/мл, в то время как у контрольных животных этот показатель составил 32,0±1,25 пг/мл.

Проведённый электронно-микроскопический анализ показал, что ультраструктура гепатоцитов крыс контрольной группы соответствовала норме (рис. 1). Гепатоциты имели полигональную форму, их цитоплазма характеризовалась умеренной электронной плотностью. Овальные и округлые ядра локализовались в центре гепатоцита, как правило, содержали преимущественно эухроматин с незначительной концентрацией гетерохроматина по периферии. В части ядер гепатоцитов отмечено эксцентрично расположенное ядрышко. В цитоплазме гепатоцитов располагались развитые эндоплазматические сети обоих типов, а также комплекс Гольджи без признаков вакуолизации. Гепатоциты содержали многочисленные розетки гликогена, а также локализованные диффузно глыбки этого углевода. Митохондрии — преимущественно овальной формы, с умеренно электронно-плотным матриксом, упорядоченной ориентацией крист. Обнаружены единичные набухшие органоиды с укороченными кристами.

 

Рис. 1. Ультраструктура гепатоцитов крыс контрольной группы (трансмиссонная электронная микроскопия, ×6700). Здесь: АЭС — агранулярная эндоплазматическая сеть; ГЭС — гранулярная эндоплазматическая сеть; М — митохондрия; Я — ядро

Fig. 1. Ultrastructure of hepatocytes of rats of the control group (transmission electron microscopy, ×6700). Here: АЭС — agranular endoplasmic reticulum; ГЭС — granular endoplasmic reticulum; M — mitochondria; Я — nucleus

 

В гепатоцитах крыс экспериментальной группы на ультраструктурном уровне отмечается трансформация формы ядер, сопровождающаяся отёком цитоплазмы и присутствием значительного числа вакуолей, в том числе содержащих липиды (рис. 2). Митохондрии характеризуются выраженной гиперплазией, полиморфизмом размеров и высокой электронной плотностью, неупорядоченной ориентацией крист. В цитоплазме наблюдается феномен осыпания рибосом с эндоплазматической сети. Существенно снижается число гранул гликогена. Комплекс Гольджи представлен несколькими концевыми мешочками и секреторными вакуолями.

 

Рис. 2. Ультраструктура гепатоцитов крыс экспериментальной группы (трансмиссонная электронная микроскопия): a — ×10 000, b — ×14 000. Здесь: ГЭС — гранулярная эндоплазматическая сеть; В — вакуоль; Л — липиды; М — митохондрия; Х — хроматин; Я — ядро

Fig. 2. Ultrastructure of hepatocytes in experimental group rats (transmission electron microscopy): a — ×10 000, b — ×14 000. Here: ГЭС — granular endoplasmic reticulum; B — vacuole; Л — lipids; M — mitochondria; X — chromatin; Я — nucleus

 

Обнаружены единичные клетки Ито в разном функциональном состоянии, но фиброзных изменений в печени животных этой группы не установлено. В просветах капилляров, так же, как и в контроле, наблюдаются клетки Купфера с плотными тельцами.

Проведённый микроморфометрический анализ митохондрий показал, что в условиях темновой депривации исследованные показатели претерпевают существенные изменения. В частности, в гепатоцитах крыс экспериментальной группы отмечено снижение величины всех изученных параметров за исключением среднего числа митохондрий на единицу площади и КВММ (табл. 1).

 

Таблица 1. Микроморфометрические параметры митохондрий гепатоцитов, M±m

Table 1. Micromorphometric parameters of hepatocyte mitochondria (M±m)

Группы

Контроль (n=20)

Эксперимент (n=20)

Средняя суммарная площадь сечений митохондрий на 100 мкм2 цитоплазмы, мкм2

25,55±5,03

22,91±1,32*

Среднее число митохондрий на 100 мкм2, шт.

96,51±6,46

75,72±4,61**

Средняя площадь сечения одной митохондрии, мкм2

0,37±0,07

0,33±0,04*

Средний периметр одной митохондрии, мкм

2,51±0,22

2,34±0,039*

Средняя суммарная длина крист в одной митохондрии, мкм

1,08±0,01

0,92±0,04***

Среднее количество крист в одной митохондрии, мкм

6,34±0,32

5,74±0,33*

Средняя длина 1 кристы, мкм

0,170±0,008

0,161±0,012***

Концентрация внутренних мембран митохондрий, мкм–1

19,83±2,73

10,64±0,85***

Примечание: здесь и далее * p ≤0,05; ** p ≤0,005; *** p ≤0,0005 в сравнении с показателями животных контрольной группы.

Note: here and after * p ≤0.05; ** p ≤0.005; *** p ≤0.0005 — in comparison with the indicators of animals in the control group.

 

ОБСУЖДЕНИЕ

Проведённое исследование позволило выявить существенное влияние дефицита эпифизарного мелатонина на ультраструктуру гепатоцитов.

К настоящему времени гепатопротективные свойства мелатонина описаны в ряде публикаций, хотя изучение их молекулярных механизмов далеко от завершения. При этом подавляющее большинство исследований посвящено изучению на клеточном и субклеточном уровне функциональных и молекулярных механизмов защитной функции данного гормона, или же нарушениям, возникающим при его дефиците. Морфологические проявления этих процессов остаются малоизученными.

Гепатопротективная функция мелатонина осуществляется за счёт того, что он является антиоксидантом прямого и непрямого действия и, образуя активные метаболиты, детоксицируя гидроксильный и пероксильный радикалы, синглетный кислород, пероксинитрит, повышает уровень и активность ферментов антиоксидантной защиты в тканях, регулирует ряд клеточных сигнальных каскадов [16]. Мелатонин воздействует и на митохондриальный гомеостаз в гепатоцитах, регулируя процессы, протекающие в этом органоиде [17].

Обнаруженные нами ультраструктурные признаки дефицита мелатонина в гепатоцитах являются морфологическими проявлениями нарушения гомеостаза этих клеток печени. Примечательно, что на светооптическом уровне каких-либо значимых изменений в строении гепатоцитов в условиях темновой депривации не отмечается [18].

Темновая депривация приводит к появлению липидосодержащих вакуолей, что является признаком развития жировой дистрофии. Этот факт обусловлен тем, что снижение содержания эпифизарного мелатонина усиливает перекисное окисление липидов и оксидативный стресс, ведёт к нарушению биосинтеза и регуляции уровня холестерина, а также к ряду других неблагоприятных изменений [19–21].

Осыпание рибосом с мембран эндоплазматического ретикулума отражает снижение белоксинтезирующих функций гепатоцитов и является характерным для стресса эндоплазматической сети признаком [22, 23].

Снижение содержания гранул гликогена в гепатоцитах крыс контрольной группы также обусловлено дефицитом мелатонина, поскольку он необходим как для синтеза, так и для накопления этого метаболита [24, 25].

Для митохондрий описан широкий спектр функциональных нарушений, возникающих при дефиците мелатонина, при этом их структурная основа практически не изучена. Однако известно, что полиморфизм митохондрий характерен для состояний, связанных с увеличением продукции аденозинтрифосфата и более высокими значениями мембранного потенциала [26]. Кристы митохондрий представляют собой основные функциональные единицы, связанные с преобразованием энергии; форма, количество и размеры их служат маркёрами функциональной активности митохондрий [27]. Выраженные изменения в структуре крист митохондрий в нашем исследовании вызваны, по всей вероятности, нарушением трансмембранного транспорта Ca2+, контроля цитохрома С и фосфодиэстеразы 1, изменением трансмембранного митохондриального потенциала и разобщением дыхательной цепи митохондрий [28]. Уменьшение числа крист в митохондриях гепатоцитов рассматривается как один из показателей гипоксии [29].

Кроме того, мелатонин непосредственно влияет на экспрессию некоторых митохондриальных генов. Несомненно, этот процесс нарушается в условиях дефицита данного гормона, что также способствует развитию описанных изменений.

ЗАКЛЮЧЕНИЕ

Проведённое исследование свидетельствует о том, что дефицит мелатонина, возникающий вследствие темновой депривации, приводит к ряду существенных ультраструктурных изменений в гепатоцитах, неразличимых на светооптическом уровне. Это проявляется в трансформации формы ядер, отёке цитоплазмы, появлении значительного количества липидсодержащих вакуолей, осыпании рибосом с шероховатой эндоплазматической сети, а также в значительных изменениях в строении митохондрий. Полученные результаты подтверждают значимость мелатонина для поддержания гомеостаза печени и негативную для него роль светового загрязнения, вызывающего дефицит этого гормона. Остаётся неясным, насколько обратимы обнаруженные изменения в гепатоцитах, можно ли их нивелировать экзогенным введением мелатонина. Не выяснен также вопрос, насколько будет изменяться структура клеток печени при более длительном воздействии темновой депривации.

ДОПОЛНИТЕЛЬНАЯ ИНФОРМАЦИЯ

Источник финансирования. Исследование выполнено в рамках государственного задания Научно-исследовательского института морфологии человека имени академика А.П. Авцына Российского научного центра хирургии имени академика Б.В. Петровского № 122030200535-1.

Конфликт интересов. Автор декларируют отсутствие явных и потенциальных конфликтов интересов, связанных с публикацией настоящей статьи.

ADDITIONAL INFORMATION

Funding source. The study was carried out within the framework of the state assignment of Avtsyn Research Institute of Human Morphology of Petrovsky National Research Centre of Surgery N 122030200535-1.

Competing interest. The authors declare the absence of obvious and potential conflicts of interest related to the publication of this article.

×

About the authors

David A. Areshidze

Avtsyn Research Institute of Human Morphology of Petrovsky National Research Centre of Surgery

Author for correspondence.
Email: labcelpat@mail.ru
ORCID iD: 0000-0003-3006-6281
SPIN-code: 4348-6781

Cand. Sci. (Biology)

Russian Federation, Moscow

References

  1. Chen L, Gu T, Li B, et al. Delta-like ligand 4/DLL4 regulates the capillarization of liver sinusoidal endothelial cell and liver fibrogenesis. Biochim Biophys Acta Mol Cell Res. 2019;1866(10):1663–1675. doi: 10.1016/j.bbamcr.2019.06.011
  2. Wang J, Mauvoisin D, Martin E, et al. Nuclear proteomics uncovers diurnal regulatory landscapes in mouse liver. Cell Metab. 2017;25(1):102–117. doi: 10.1016/j.cmet.2016.10.003
  3. Hu S, Yin S, Jiang X, et al. Melatonin protects against alcoholic liver injury by attenuating oxidative stress, inflammatory response, and apoptosis. Eur J Pharmacol. 2009;616(1-3):287–292. doi: 10.1016/j.ejphar.2009.06.044
  4. Wu N, Meng F, Zhou T, et al. Prolonged darkness reduces liver fibrosis in a mouse model of primary sclerosing cholangitis by miR-200b down-regulation. FASEB J. 2017;31(10):4305–4324. doi: 10.1096/fj.201700097R
  5. Berezovskiy VA, Yanko RV, Litovka IG, Volovich OI. Exogenous melatonin effects on the reactivity of rats liver parenchima. Ukraїns’kij morfologіchnij al’manah. 2012;10(4):178–181. EDN: RPDYJB
  6. Yanko R. The combined influence of the intermittent normobaric hypoxia and melatonin on morphofunctional activity of the rat’s liver parenchyma. Bulletin of Taras Shevchenko National University of KyivProblems of Physiological Functions Regulation. 2018;25(2):36–40.
  7. Abbasoglu O, Berker M, Ayhan A, et al. The effect of the pineal gland on liver regeneration in rats. J Hepatol. 1995;23(5):578–581. doi: 10.1016/0168-8278(95)80065-4
  8. Pan M, Song YL, Xu JM, Gan HZ. Melatonin ameliorates nonalcoholic fatty liver induced by high-fat diet in rats. J Pineal Res. 2006;41(1):79–84. doi: 10.1111/j.1600-079X.2006.00346.x
  9. Owino S, Contreras-Alcantara S, Baba K, Tosini G. Melatonin signaling controls the daily rhythm in blood glucose levels independent of peripheral clocks. PLoS One. 2016;11(1):e0148214. doi: 10.1371/journal.pone.0148214
  10. Fosslien E. Mitochondrial medicine — molecular pathology of defective oxidative phosphorylation. Ann Clin Lab Sci. 2001;31(1):25–67.
  11. Acuña Castroviejo D, Martín M, Macías M, et al. Melatonin, mitochondria, and cellular bioenergetics. J Pineal Res. 2001;30(2):65–74. doi: 10.1034/j.1600-079x.2001.300201.x
  12. Reiter RJ, Tan DX, Mayo JC, et al. Melatonin as an antioxidant: biochemical mechanisms and pathophysiological implications in humans. Acta Biochim Pol. 2003;50(4):1129–1146. doi: 10.18388/abp.2003_3637
  13. Balkanov AS, Rozanov ID, Golanov AV, et al. Endothelium changes of peritumoral zone capillaries after brain glioblastoma adjuvant radiation therapy. Clinical and Experimental Morphology. 2021;10(1):33–40. EDN: KOULJY doi: 10.31088/CEM2021.10.1.33-40
  14. Kurbat MN, Kravchuk RI, Ostrovskaya AB. Effect of melatonin on the morphology of mitochondria and other cellular components of the hepatocyte. Hepatology and Gastroenterology. 2018;2(2):138–142. EDN: TTCMUQ
  15. Bezborodkina NN, Okovity SV, Kudryavtseva MV, et al. Morphometry of hepatocyte mitochondrial apparatus in normal and cirrhotic rat liver. Tsitologiya. 2008;50(3):228–237. EDN: ILHEHH
  16. Chrustek A, Olszewska-Słonina D. Melatonin as a powerful antioxidant. Acta Pharm. 2020;71(3):335–354. doi: 10.2478/acph-2021-0027
  17. Xiong Y, Ma C, Li Q, et al. Melatonin ameliorates simulated-microgravity-induced mitochondrial dysfunction and lipid metabolism dysregulation in hepatocytes. FASEB J. 2023;37(9):e23132. doi: 10.1096/fj.202301137R
  18. Areshidze DA, Kakturskiy LV, Mikhaleva LM, Kozlova MA. Influence of dark deprivation and chronic alcohol intoxication on the liver of rats. Morphology. 2023;161(2):23–35. doi: 10.17816/morph.623050
  19. Hatzis G, Ziakas P, Kavantzas N, et al. Melatonin attenuates high fat diet-induced fatty liver disease in rats. World J Hepatol. 2013;5(4):160–169. doi: 10.4254/wjh.v5.i4.160
  20. Terziev D, Terzieva D. Experimental data on the role of melatonin in the pathogenesis of nonalcoholic fatty liver disease. Biomedicines. 2023;11(6):1722. doi: 10.3390/biomedicines11061722
  21. Ku H, Kim Y, Kim AL, et al. Protective effects of melatonin in high-fat diet-induced hepatic steatosis via decreased intestinal lipid absorption and hepatic cholesterol synthesis. Endocrinol Metab (Seoul). 2023;38(5):557–567. doi: 10.3803/EnM.2023.1672
  22. Lebeaupin C, Vallée D, Hazari Y, et al. Endoplasmic reticulum stress signalling and the pathogenesis of non-alcoholic fatty liver disease. J Hepatol. 2018;69(4):927–947. doi: 10.1016/j.jhep.2018.06.008
  23. Fernández A, Ordóñez R, Reiter RJ, et al. Melatonin and endoplasmic reticulum stress: relation to autophagy and apoptosis. J Pineal Res. 2015;59(3):292–307. doi: 10.1111/jpi.12264
  24. Watanabe K, Katagiri S, Hattori A. Melatonin and glucose metabolism. Glycative Stress Research. 2020;7(1):105–109.
  25. Devin A, Rigoulet M. Mechanisms of mitochondrial response to variations in energy demand in eukaryotic cells. Am J Physiol Cell Physiol. 2007;292(1):C52–C58. doi: 10.1152/ajpcell.00208.2006
  26. Baker N, Patel J, Khacho M. Linking mitochondrial dynamics, cristae remodeling and supercomplex formation: how mitochondrial structure can regulate bioenergetics. Mitochondrion. 2019;49:259–268. doi: 10.1016/j.mito.2019.06.003
  27. Guan Q, Wang Z, Cao J, et al. Mechanisms of melatonin in obesity: a review. Int J Mol Sci. 2021;23(1):218. doi: 10.3390/ijms23010218
  28. Guha M, Maity P, Choubey V, et al. Melatonin inhibits free radicalmediated mitochondrial-dependent hepatocyte apoptosis and liver damage induced during malarial infection. J Pineal Res. 2007;43(4):372–381. doi: 10.1111/j.1600-079X.2007.00488.x
  29. Wu J, Danielsson A. Detection of hepatic fibrogenesis: a review of available techniques. Scand J Gastroenterol. 1995;30(9):817–825. doi: 10.3109/00365529509101585

Supplementary files

Supplementary Files
Action
1. JATS XML
Download
2. Fig. 1. Ultrastructure of hepatocytes of rats of the control group (transmission electron microscopy, ×6700). Here: АЭС — agranular endoplasmic reticulum; ГЭС — granular endoplasmic reticulum; M — mitochondria; Я — nucleus

Download (362KB)
Indexing metadata
3. Fig. 2. Ultrastructure of hepatocytes in experimental group rats (transmission electron microscopy): a — ×10 000, b — ×14 000. Here: ГЭС — granular endoplasmic reticulum; B — vacuole; Л — lipids; M — mitochondria; X — chromatin; Я — nucleus

Download (337KB)
Indexing metadata

Copyright (c) 2023 Eco-Vector

License URL: https://eco-vector.com/for_authors.php#07
Периодический печатный журнал зарегистрирован как СМИ Федеральной службой по надзору в сфере связи, информационных технологий и массовых коммуникаций (Роскомнадзор): № 0110212 от 08.02.1993.
Сетевое издание зарегистрировано как СМИ Федеральной службой по надзору в сфере связи, информационных технологий и массовых коммуникаций (Роскомнадзор): ЭЛ № ФС 77 - 84733 от 10.02.2023.