Всасывание зеленого флюоресцентного белка клетками проксимальных канальцев почки крысы и накопление в них при увеличении его поступления в кровь



Цитировать

Полный текст

Аннотация

Методом лазерной конфокальной микроскопии исследовали всасывание зеленого флюоресцентного белка (GFP) в проксимальных канальцах почки у анестезированных крыс при введении GFP в кровь или тонкую кишку. Установлена корреляция между величиной специфической флюоресценции в клетках проксимальных канальцев и логарифмом дозы введенного в вену GFP (r=0,96, P<0,05). Флюоресценция GFP после внутривенных инъекций превышала флюоресценцию, обусловленную введением GFP в тонкую кишку (P<0,05). С повышением дозы введенного GFP в цитоплазме эпителиоцитов, наряду с диффузным свечением, выявлялись крупные пузырьки с высоким уровнем флюоресценции, что подтверждено графическим анализом. Выявленные изменения интенсивности и характера специфической флюоресценции свидетельствуют о повышении всасывания GFP в клетках проксимальных канальцев и накоплении во внутриклеточных компартментах при увеличении его поступления в кровь.

Об авторах

Н П ПРУЦКОВА

Институт эволюционной физиологии и биохимии им. И.М. Сеченова РАН, Санкт-Петербург

Email: prutsk@iephb.ru
Лаборатория физиологии почки и водно-солевого обмена; Институт эволюционной физиологии и биохимии им. И.М. Сеченова РАН, Санкт-Петербург

Е В СЕЛИВЕРСТОВА

Институт эволюционной физиологии и биохимии им. И.М. Сеченова РАН, Санкт-Петербург

Лаборатория физиологии почки и водно-солевого обмена; Институт эволюционной физиологии и биохимии им. И.М. Сеченова РАН, Санкт-Петербург

Список литературы

  1. Бурмакин М.В., Селиверстова Е.В. и Наточин Ю.В. Накопление жёлтого флюоресцентного белка в почке после его всасывания в кишечнике крыс. Рос. физиол. журн., 2005, т. 91, № 10, с. 1195-1204.
  2. Бурмакин М.В., Селиверстова Е.В. и Наточин Ю.В. Динамика всасывания в кишке и реабсорбции в почке желтого флюоресцентного белка у крыс в постнатальном онтогенезе. Журн. эвол. биохим., 2007, т. 43, № 2, с. 187-193.
  3. Селивёрстова Е.В., Бурмакин М.В., Шахматова Е.И. и др. Аккумуляция в почке экзогенного белка после его всасывания в кишечнике при развитии экспериментальной почечной недостаточности у крыс. Нефрология, 2007, т. 11, № 1, с. 7-15.
  4. Baran D., Tendstad O. and Aukland K. Localization of tubular uptake segment of filtered cystatin C and aprotinin in the rat kidney. Acta Physiol., 2006, v. 186, p. 209-221.
  5. Berin M.C., Li H. and Sperber K. Antibody-mediated antigen sampling across intestinal epithelial barriers. Ann. N. Y. Acad. Sci., 2006, v. 1072, p. 253-261.
  6. Borges E.L., Petroianu A., Barbosa A.J. et al. Jejunal absorption of trypsin in rat and guinea pig. Braz. J. Med. Biol. Res., 1995, v. 28, № 1, p. 65-73.
  7. Cloutier M., Gingras D. and Bendayan M. Internalization and transcytosis of pancreatic enzymes by the intestinal mucosa. J. Histochem. Cytochem., 2006, v. 54, № 7, p. 781-794.
  8. Cococel C., Maita K., Baumann K. and Hook J.B. Renal processing of low molecular weight proteins. Pflьgers Arch., 1984, v. 401, № 4, p. 333-339.
  9. Crameri A., Whitehorn E.A., Tate E. and Stemmer W.P. Improved green fluorescent protein by molecular evolution using DNA shuffling. Nat. Biotechnol., 1996, v. 14, p. 315-319.
  10. Hysing J. and Tolleshaug H. Quantitative aspects of the uptake and degradation of lysozyme in the rat kidney in vivo. Biochim. Biophys. Acta, 1986, v. 887, № 1, p. 42-50.
  11. Seliverstova E.V., Burmakin M.V. and Natochin Yu.V. Renal clearance of absorbed intact GFP in the frog and rat intestine. Comp. Biochem. Physiol. A. Mol. Integr. Physiol., 2007, v. 147, № 4, p. 1067-1073.
  12. Takano M., Koyama Y., Nishikawa H. et al. Segment-selective absorbtion of lysozyme in the intestine. Eur. J. Pharmacol., 2004, v. 502, № 1-2, p. 149-155.
  13. Tenstad O., Roald A.B., Grubb A. and Aukland K. Renal handling of radiolabelled human Cystatin C in the rat. Scand. J. Clin. Lab. Invest., 1996, v. 56, № 5 p. 409-414.
  14. Tsien R.Y. The green fluorescent protein. Annu. Rev. Biochem., 1998, v. 67, p. 509-544.
  15. Udall J.N., Colony P., Fritze L. et al. Development of gastrointestinal mucosal barrier. II. The effect of natural versus artificial feeding on intestinal permeability to macromolecules. Pediatr Res., 1981, v. 15, № 3, p. 245-259.
  16. Verkusha V.V., Kuznetsova I.M., Stepanenko O.V. et al. High stability of Discosoma DsRed as compared to Aequorea EGFP. Biochemistry, 2003, v. 42, № 26, p. 7879-7884.
  17. Walker W.A. and Bloch K.J. Intestinal uptake of macromolecules in vitro and in vivo studies. Ann. N.Y. Acad. Sci., 1983, v. 409, p. 593-602.
  18. Zhai X.Y., Birn H., Jensen K.B. et al. Digital three-dimentional reconstruction and ultrastructure of the mouse proximal tubule. J. Am. Soc. Nephrol., 2003, v. 14, № 3, p. 611-619.
  19. Ziv E. and Bendayan M. Intestinal absorption of peptides through the enterocytes. Microscop. Res. Techniq., 2000, v. 49, № 4, p. 346-352.
  20. Ziv E., Lior O. and Kidron M. Absorption of protein via the intestinal wall. A quantative model. Biochem. Pharmacol., 1987, v. 36, № 7, p. 1035-1039.

Дополнительные файлы

Доп. файлы
Действие
1. JATS XML

© Эко-Вектор, 2009



Периодический печатный журнал зарегистрирован как СМИ Федеральной службой по надзору в сфере связи, информационных технологий и массовых коммуникаций (Роскомнадзор): 0110212 от 08.02.1993.
Сетевое издание зарегистрировано как СМИ Федеральной службой по надзору в сфере связи, информационных технологий и массовых коммуникаций (Роскомнадзор): ЭЛ № ФС 77 - 84733 от 10.02.2023.