ОПТИМИЗАЦИЯ МЕТОДА ИММУНОЦИТОХИМИЧЕСКОГО ВЫЯВЛЕНИЯ НЕСТИНА НА ПАРАФИНОВЫХ СРЕЗАХ ГОЛОВНОГО МОЗГА КРЫСЫ



Цитировать

Полный текст

Аннотация

Цель настоящего исследования состояла в разработке оптимального и простого протокола иммуноцитохимического выявления нестина (одного из белков промежуточных филаментов, часто используемого для маркирования нейральных стволовых клеток) в парафиновых срезах головного мозга крысы, с исключением процедур демаскирования антигена, нарушающих структуру ткани. Изучено влияние фиксации, характера блокирования неспецифического связывания антител, температурного режима и времени инкубации на результаты иммуноцитохимической реакции. На основании полученных результатов, предложен протокол обработки, позволяющий добиться четкого выявления нестина в клетках головного мозга крысы при оптимальном сохранении структуры нервной ткани

Об авторах

Д Э Коржевский

Институт экспериментальной медицины РАМН

Отдел морфологии (зав. - чл.-кор. РАМН проф. Б.А. Отеллин); Институт экспериментальной медицины РАМН

А В Гиляров

Институт экспериментальной медицины РАМН

Отдел морфологии (зав. - чл.-кор. РАМН проф. Б.А. Отеллин); Институт экспериментальной медицины РАМН

D E Korzhevskiy

A V Gilyarov

Список литературы

  1. Коржевский Д.Э. Использование моноклональных антител к ядерному белку PCNA для выявления пролиферирующих клеток в развивающемся головном мозге человека. Морфология, 2000, т. 118, вып. 5, с. 68-70.
  2. Коржевский Д.Э., Григорьев И.П. и Отеллин В.А. Применение обезвоживающих фиксаторов, содержащих соли цинка, в нейрогистологических исследованиях. Морфология, 2006, т. 129, вып. 1, с. 85-86.
  3. Коржевский Д.Э., Кирик О.В., Гиляров А.В. и др. Нестин в клетках головного мозга крысы после кратковременной общей ишемии. В кн.: Материалы XIII международного совещания и VI школы по эволюционной физиологии. СПб., изд. РАН, 2006, с. 113.
  4. Andressen C., Stocker E., Klinz F.-J. et al. Nestin-specific green fluorescent protein expression in embryonic stem cell-derived neural precursor cells used for transplantation. Stem Cells, 2001, v. 19, № 5, p. 419-424.
  5. Dahlstrand J., Lardelli M. and Lendahl U. Nestin mRNA expression correlates with the central nervous system progenitor cell state in many, but not all, regions of developing central nervous system. Brain Res. Dev. Brain Res., 1995, v. 84, № 1, p. 109-129.
  6. Ernst C. and Christie B.R. Nestin-expressing cells and their relationship to mitotically active cells in the subventricular zones of the adult rat. Eur. J. Neurosci., 2005, v. 22, № 12, p. 3059-3066.
  7. He Z., Cui L., Meschia J.F. et al. Hippocampal progenitor cells express nestin following cerebral ischemia in rats. Neuroreport, 2005, v. 16, № 14, p. 1541-1544.
  8. Naish S.J. Immunochemical staining methods. DAKO Corporation, 1989.
  9. Wiese C., Rolletschek A., Kania G. et al. Nestin expression - a property of multi-lineage progenitor cells? Cell Mol. Life Sci., 2004, v. 61, № 19-20, p. 2510-2522.

Дополнительные файлы

Доп. файлы
Действие
1. JATS XML
Скачать

© Эко-Вектор, 1970


Периодический печатный журнал зарегистрирован как СМИ Федеральной службой по надзору в сфере связи, информационных технологий и массовых коммуникаций (Роскомнадзор): № 0110212 от 08.02.1993.
Сетевое издание зарегистрировано как СМИ Федеральной службой по надзору в сфере связи, информационных технологий и массовых коммуникаций (Роскомнадзор): ЭЛ № ФС 77 - 84733 от 10.02.2023.