ПРИМЕНЕНИЕ МЕТОДА ЩЕЛОЧНОЙ ДИССОЦИАЦИИ В ИЗУЧЕНИИ КОМПОНЕНТОВ СТЕНКИ АОРТЫ

Аннотация

Полный текст

Проведение морфометрического анализа на серийных срезах не всегда дает возможность получения объективных морфологических параметров. Апробирован метод щелочной диссоциации для изучения компонентов стенки аорты человека и животных. Метод включает в себя длительную (14-20 сут) фиксацию ткани аорты в 10% формалине, диссоциацию в 50% водном растворе КОН в течение 24 ч, гомогенизацию полученного материала, промывку полученной суспензии и нанесение ее на предметное стекло с последующей окраской. Выделены отдельные изолированные компоненты стенки брюшного отдела аорты: эластические мембраны и клетки - у 20 человек обоего пола в возрасте от 50 до 60 лет. В каждом случае проводили кариометрию изолированных гладких мышечных клеток, полученных из средней оболочки аорты. Для количественных характеристик рассчитывалась описательная статистика, анализировались гистограммы их распределения по фактору формы и логарифму площади ядра. Анализ таких гистограмм позволил выявить гетероморфию и предположить наличие двух популяций гладких мышечных клеток (сократительного и синтетического типа) в стенке брюшного отдела аорты человека. В отличие от серийных срезов, при проведении морфометрии изолированных клеток снимались такие ошибки измерения, как различный уровень срезов клеток и ядер, а благодаря отчетливому выявлению границ клеток появились дополнительные возможности проведения измерений, в частности, расчет ядерно-цитоплазматического отношения.