Changes in pathomorphological condition of myocardium in dysferlinopathy mice (Bla/J type)



Cite item

Full Text

Open Access Open Access
Restricted Access Access granted
Restricted Access Subscription or Fee Access

Abstract

BACKGROUND: Dysferlinopathy is heritable progressing muscular dystrophy which is caused by mutation in gene DYSF. Currently, there is skeletal muscle pathology definition, bur there is only fragmentary and limited myocardium hystopathology data. 

AIM: execution of analysis of pathomorphological status of myocardium in Bla/J mice of different age, which are the model of dysferlinopathy. 

METHODS: Material is illustrated by the example of two experimental groups: Bla/J mice with knockout DYSF gene on 3, 6, 12 months old and control wild Balb/C mice 6 months old. There was study of expression and pattern of dyeing of protein dysferlin in immunofluorescent search method. There was held such parameters as hystological charachteristic of myocardium of three dyeing protocols (hematoxylin and eosin, iron hematoxylin by Rego, hematoxylin-basic fuchsin-picric acid by Lie), morphometry of the parameters of cardiomyocytes (length, width of cardiomyocytes and nuclear perimeter).

RESULTS: The immunofluorescent search method revealed high quantity of dysferlin in myocardium only in control group. Statistical analysis showed the significant differences between Bla/J and Balb/C mice: the increasing length and width of cardiomyocytes in dysferlinopathy — by 49,9 (95% confidence interval: 45,9–57,4)% and by 35,6 (95% confidence interval: 32,9–37,9)% respectively. Nucleus perimeter was significantly reduced in dysferlinopathy group with 6 months disease duration (by 23,9 (95% confidence interval: 20,2–27,5)% in comparing with 3 months group, and by 18,8 (95% confidence interval: 8,5–19,7)% in comparing with the control. Consequently, there were found progressive hypertrophy of cardiomyocytes and increasing deformation in cardiomyocytes, intercalated discs destruction, hypoxia features and necrosis indication resulting fibrosis. There was pattern of cardiomyocytes size reduction in dependence with aging process. 

CONCLUSION: Dysferlin deficiency leads to significant damage in myocardium in Bla/J mice.

Full Text

Обоснование

Дисферлинопатия — это наследственная прогрессирующая мышечная дистрофия, проявляющаяся дистальным, проксимальным, проксимо-дистальным, а также врожденным вариантами клинических фенотипов [1]. Её распространенность в мире составляет до 1:200 000 новорожденных [2, 3]. Наследование заболевания преимущественно аутосомно-рецессивное, однако описан и доминантный тип [4, 5]. Причиной развития дисферлинопатии являются мутации в гене DYSF, локализованном в коротком плече второй хромосомы [4]. Основной функцией дисферлина является обеспечение репарации сарколеммы и эндоплазматического ретикулума мышечных волокон поперечнополосатой скелетной мускулатуры, однако значение этого белка для цито- и гистофизиологии кардиомиоцитов остается недостаточно изученным. 

По данным L. Anderson и соавт. (1999), дисферлин экспрессируется с 5–6 недели эмбриогенеза и выявляется во многих тканях организма человека, но влияет преимущественно на развитие мышечной ткани [6, 7]. При дефиците дисферлина наиболее выраженные патологические изменения возникают в поперечнополосатой скелетной мышечной ткани. Накоплены обширные сведения о патоморфологических особенностях дистрофического процесса в скелетных мышцах, как у животных, так и у людей [8, 9, 10, 11]. Установлено, что в мышечных волокнах отмечаются разрывы и инвагинации сарколеммы, субсарколеммальные скопления везикул, вакуолизация, слияние митохондрий, расширение цистерн саркоплазматической сети, дезорганизация миофибрилл и Т-трубочек [8, 12]. Описанные изменения обусловлены неэффективностью внутриклеточной регенерации, и, как следствие, некрозом, воспалением, липоидозом и фиброзом мышечных волокон [8, 13]. За последние 20 лет появились данные о значении дисферлина для функционирования миокарда [14, 15, 16, 17]. Преимущественное исследование дистрофического процесса в скелетных мышцах обусловлено их приоритетным вовлечением и большей доступностью для гистологического исследования. Данные о гистопатологии миокарда при дисферлинопатии фрагментарны и ограничены, так как кардиомиопатия не имеет очевидных клинических проявлений до поздней стадии заболевания, а биопсийное исследование миокарда не целесообразно. 

Цель 

Оценить патологические изменения в поперечнополосатой сердечной мышечной ткани при дисферлинопатии у мышей линии Bla/J в различные возрастные периоды.

Материалы и Методы

Дизайн исследования

Представлено обсервационное одноцентровое проспективное сплошное контролируемое нерандомизированное исследование. В качестве объекта исследования выбрана прогрессирующая мышечная дистрофия  — дисферлинопатия, в качестве предмета — патоморфологические изменения миокарда модельных мышей линии Bla/J, нокаутных по гену DYSF. Задачами исследования являлось определение и сравнение гистологических изменений миокарда у мышей линии Bla/J с дисферлинопатией и мышей линии Balb/C без дисферлинопатии. Схема проведения исследования включала в себя поэтапное изготовление парафиновых срезов миокарда животных исследуемой и контрольной группы с последующей окраской и морфометрией. Изготовление парафиновых срезов проведено по классической методике [18]. Миокард мышей обеих групп исследован на наличие белка дисферлина с использованием иммунофлюоресцентного метода. Фрагменты сердечной мышцы помещали в изопентан, охлажденный в жидком азоте, толщина криосрезов — 10 мкм. 

Критерии соответствия

В исследование включены животные линии Bla/J, являющиеся моделью дисферлинопатии (линия создана путем вставки ретротранспозона в 4 интрон) и животные «дикого» типа линии Balb/C. Возраст животных — от 3 до 12 месяцев включительно. 

Условия проведения

Исследование проводилось на базе кафедры патологической анатомии Северо-Западного государственного университета имени И. И. Мечникова, г. Санкт-Петербург. 

Продолжительность исследования

Включение в исследование осуществлялось на сроках 3, 6, 12 месяцев жизни животных исследуемой группы; в контрольную группу включение животных осуществлялось одномоментно на сроке жизни 6 месяцев. Умерщвление животных проводилось с использованием декапитации. 

Основной исход исследования

Конечная точка исследования — описать патогистологические характеристики миокарда мышей с дисферлинопатией и сравнить их с характеристиками миокарда здоровых мышей. 

Анализ в группах

Исследуемая группа представлена 7 самцами мышей линии Bla/J в качестве модели дисферлинопатии в возрасте 3, 6 и 12 месяцев (3, 3 и 1 особь соответственно). Контрольная группа включала 2 здоровых самцов мышей линии Balb/C в возрасте 6 месяцев. Сравнение проводилось внутри каждой из групп, а также между каждой возрастной подгруппой линии Bla/J и линией Balb/C. 

Методы регистрации исходов

Препараты парафиновых срезов миокарда окрашивали гематоксилином и эозином, железным гематоксилином по Рего (оценка сохранности поперечной исчерченности поперечнополосатый мышечной ткани миокарда) [19], гематоксилин-основной фуксин-пикриновая кислота (ГОФПК) по Ли (выявление признаков гипоксического повреждения кардиомиоцитов) [19]. 

Кардиомиоциты характеризовали при помощи морфометрического учета трех параметров: расстояние между вставочными дисками (длина), толщина и периметр ядер (формат 2D в программе AxioVision v. 4.9.1, США).

На криосрезах ставили реакции с использованием первичных кроличьих моноклональных антител к дисферлину (ab124684, 1:200, Abcam, Великобритания). В качестве вторичных антител применяли Alexa Fluor 647 (1:200, Invitrоgen, США) с докраской ядер DAPI (Servicebio, Китай). Препараты сканировали в микроскопе 3DHISTTECH Pannoramic 250 Flash, (ZEISS, Венгрия).

Этическая экспертиза

Содержание и экспериментальная работа с животными проводились в соответствии с одобрением локального этического комитета ФГАОУ ВО "Казанский (Приволжский) федеральный университет" (протокол №14 от 08.02.2019 г.).

Статистический анализ

Размер выборки предварительно не рассчитывался. 

Для анализа результатов применен набор инструментов описательной и аналитической статистики, реализованный в программе Past (версия 4.09, Норвегия) [20]. Для проверки статистической однородности нескольких выборок были использованы процедуры однофакторного (критерий Фридмана) и двухфакторного (критерий Краскела–Уоллиса) дисперсионного анализа. Центральные тенденции выборок представлены в виде средних значений (М) и медиан (Ме) в зависимости от соответствия/несоответствия нормальному распределению. Дисперсия центральных тенденций представлена в виде 95% доверительных интервалов (ДИ), рассчитанных методом бутстрэпа и Монте-Карло. Для последующего выявления неоднородных групп применяли процедуры множественных сравнений — критерий Манна-Уитни с поправкой Бонферрони. Для анализа корреляций — ранговый коэффициент корреляции Спирмена. Линейная зависимость переменных описана с помощью уравнения парной линейной регрессии (y = bх + a), где b («slope» — англ. наклон) — угловой коэффициент; a («intercept» –—от англ. пересечение) — свободный член линии оценки, для которых также рассчитаны 95% ДИ. При проверке статистических гипотез ориентировались на р-значения и 95% ДИ, а для изучаемых различий оценивали абсолютный и относительный размеры эффекта (effect size) [21, 22]. Относительный размер эффекта рассчитан по методу Коэна dC (Cohen). Доверительные интервалы для dC вычисляли с помощью электронной таблицы EffectSizeCalculator.xls и программы Effect Size Generator.xls. Для графической реализации данных использовалась интерактивная программа BoxPlotR (http://shiny.chemgrid.org/boxplotr/).

Результаты

Основные результаты исследования

В миокарде мышей линии Bla/J наблюдались признаки нарушения структуры ткани с тенденцией к нарастанию патологических изменений от 3 к 12 месяцам (рис. 1). В возрасте 3 месяцев кардиомиоциты правильно ориентированы, не деформированы, признаков дискомплексации нет. У животных в возрасте 6 месяцев расположение кардиомиоцитов непараллельное, а в возрасте 12 месяцев появляются признаки утраты комплексности ткани, волнообразная деформация мышечных клеток, отмечено увеличение толщины (диаметра) кардиомиоцитов.  

Морфометрические характеристики кардиомиоцитов животных Bla/J и контроля статистически значимо различались по ряду параметров (рис. 2). 

Длина кардиомиоцитов мышей линии Bla/J на всех сроках была статистически значимо больше, чем у мышей контрольной группы, максимально на 3 месяце заболевания – 49,9 (95% ДИ: 45,9; 57,4) %, р = 5,4 × 10–48 (табл. 1). При этом исследуемые подгруппы животных линии Bla/J статистически значимо отличались друг от друга при наличии тренда на уменьшение длины кардиомиоцитов при увеличении возраста животных. Это явление описано уравнением линейной регрессии: y = -6,51х + 254,33 (95% ДИ: slope -8,7; -4,2; intercept 240,8; 267,9; р = 1,5 х 10-6). Таким образом, возраст животных и длина кардиомиоцитов имеют линейное соотношение. 

Толщина (диаметр) кардиомиоцитов мышей всех возрастных подгрупп линии Bla/J статистически значимо больше, чем в контрольной группе, причем максимально на 6 месяце заболевания — 35,6 (95% ДИ: 32,9; 37,9)%, р = 8,4 × 10–59. Между исследуемыми возрастами животных линии Bla/J статистически значимых различий этого параметра не выявлено.  

При оценке периметра ядер кардиомиоцитов, являющегося косвенным признаком синтетической активности клетки, выявлено статистически значимое уменьшение этого параметра в подгруппе Bla/J (6 месяцев) на 23,9 (95% ДИ: 20,2; 27,5)%, чем в подгруппе Bla/J (3 месяца), р = 0,04, и на 18,8 (95% ДИ: 8,5; 19,7)% по сравнению с контрольной группой, р = 8,4 × 10–59. Уменьшение периметра ядер с увеличением времени наблюдения за опытной группой описано уравнением линейной регрессии: y = -0,63х + 101 (95% ДИ: slope –1,1; –0,2; intercept 98,4; 104,6; р = 0,008). Периметр ядер и продолжительность наблюдения за опытной группой имеют линейное соотношение. 

При окрашивании железным гематоксилином у мышей линии Bla/J с 3 месяцев выявлялся диффузный межмышечный фиброз миокарда, а также исчезновение поперечной исчерченности у части кардиомиоцитов и разрушение вставочных дисков (рис. 3А). В контрольной группе (Balb/С) миокард был интактным с правильно ориентированными кардиомиоцитами, сохранной поперечной исчерченностью, вставочные диски визуализировались, а фиброз отсутствовал (рис. 3С).

При окрашивании ГОФПК на 3 месяце заболевания были выявлены гипоксические изменения (рис. 3В). В контрольной группе мышей (Balb/С) в миокарде отсутствовали признаки гипоксического повреждения (рис. 3D). 

При проведении иммунофлюоресцентной реакции с антителами к дисферлину в миокарде мышей линии Bla/J 3-месячного возраста белок не выявлен (рис. 4A). У мышей контрольной группы результат был положительным (рис. 4В), дисферлин был представлен в виде включений в саркоплазме и в области вставочных дисков.  

Обсуждение

Резюме основного результата исследования

В миокарде мышей линии Bla/J при отсутствии белка дисферлина выявлено нарушение структуры кардиомиоцитов (по качественным и количественным признакам) и архитектоники миокарда, усиливающихся с возрастом животных. В контрольной группе (при наличии дисферлина) подобных изменений не выявлено, что позволяет сделать вывод о том, что отсутствие дисферлина является основным фактором развития патоморфологических изменений миокарда.

Обсуждение основного результата исследования

У животных линии Bla/J состояние миокарда характеризовалось волнообразной деформацией кардиомиоцитов, нарушением параллельной ориентированности кардиомиоцитов и гипоксическим повреждением. Ранее было показано, что в миокарде животных других артифициально полученных линий мышей с дисферлинопатией (линии A/J, C57BL/6J, SJL/J) подобных изменений не выявлено [23]. 

Кроме того, установлено исчезновение вставочных дисков у животных с дисферлинопатией и значимое увеличение расстояния между вставочными дисками, по сравнению с животными контрольной группы. Сходные изменения были показаны ранее в миокарде мышей линии C57BL/6J на «поздних» сроках течения дисферлинопатии, характеризующиеся разрушением до трети вставочных дисков кардиомиоцитов [24].

Выявлены признаки значимой гипертрофии кардиомиоцитов у мышей линии Bla/J, начиная с 3 месяца заболевания и максимально выраженные на 6 месяце. Причиной развития гипертрофии кардиомиоцитов вероятно является ремоделирование Т-системы кардимоцитов в виде укорочения Т-трубочек, их аксиальной переориентацией и разобщением с саркомерами [15, 25]. Данный патологический процесс ведет к изменению гомеостаза кальция в кардиомиоцитах, определяющего функционирование сигнального пути кальций-кальмодулин [26, 27]. Гипертрофия миокарда также была описана у дисферлин-дефицитных мышей линии B6.129-Dysftm1Kcam/J на 3 месяце жизни в виде повышения отношения массы сердца к массе тела без утолщения стенок желудочков и расширения полостей [28]. При этом в изолированных кардиомиоцитах установлена лишь небольшая тенденция к увеличению размеров [28]. Таким образом, при прогрессировании дисферлинопатии у мышей с возрастом развивается гипертрофии кардиомиоцитов.

Межмышечный фиброз у мышей линии Bla/J выявлялся уже на 3 месяце заболевания в отличие от дисферлин-дефицитных мышей линии B6.129-Dysftm1Kcam/J, у которых фиброз детектировался лишь на 20 месяце заболевания и проявлялся трехкратным увеличением количества коллагена в строме органа по сравнению с контролем [15, 28]. У мышей линии A/J также не отмечалось значимого фиброза [14]. В частности, долевое содержание коллагена нарастало с 2 до 3% в период с 2 до 18 месяцев наблюдения и не отличалось от контрольной линии мышей A/HeJ [14]. Подобная вариабельность выраженности фиброза миокарда среди различных линий дисферлин-дефицитных мышей требует дальнейших исследований. 

Дисферлин в миокарде контрольной линии мышей Balb/C располагался перинуклеарно, в области вставочных дисков и в эндотелиоцитах, что соответствует ранее представленным сведениям [12, 14, 15, 25]. Также ряд исследователей указывает на наличие дисферлина в тубулярной системе кардиомиоцитов и вблизи кальциевых каналов L-типа и рианодиновых рецепторов [12, 25]. В миокарде мышей линии Bla/J дисферлин не выявлен, что является предполагаемым субстратом развития каскада патологических изменений в миокарде. 

Сравнивая полученные результаты с исследованиями сердца пациентов с поясно-конечностной мышечной дистрофией (ПКМД) R2 (дисферлинопатией), можно провести некоторые параллели. В одном из описанных клинических случаев дисферлинопатии с дилатационной кардиомиопатии была выявлена гипертрофия кардиомиоцитов с увеличением размера ядер и интерстициальным фиброзом [23]. В другом клиническом примере дилатационной кардиомиопатии, выявленной по эхокардиографии, у пациента с дисферлинопатией зарегистрирована лишь вариабельность размера кардиомиоцитов и дезорганизация их расположения [29]. Следует отметить, что диффузный фиброз и жировая инфильтрация миокарда могут быть обнаружены у пациентов с дисферлинопатией без признаков кардиомиопатии [16]. Таким образом, при крайне редкой встречаемости выраженной дилатационной кардиомиопатии у пациентов с дисферлинопатией, приблизительно в 50% случаев развиваются структурные (миокардиальный фиброз) и функциональные (начальная стадия диастолической дисфункции) изменения миокарда [30].

Ограничения исследования

В исследование включена только одна модель дисферлинопатии — линия Bla/J, что затрудняет экстраполяцию результатов на другие модели. Отсутствие электронной микроскопии не позволило оценить изменения миокарда на микроструктурном уровне. Также не применялись методы исследования функционального состояния миокарда у животных, что исключает оценку клинических проявлений выявленных морфологических изменений. 

Заключение

Таким образом, нарушение структуры миокарда у дисферлин-дефицитных мышей линии Bla/J, увеличивается с возрастом животных и включает гипертрофию кардиомиоцитов и миокардиальный фиброз. Отсутствие белка дисферлина является ключевым фактором развития патоморфогенеза кардиомиопатий у экспериментальных животных, в частности линии Bla/J.  

Вовлечение миокарда в патологический процесс при дисферлинопатии подтверждается выявлением гипертрофии кардиомиоцитов у дисферлин-дефицитных линий мышей и пациентов с поясно-конечностной мышечной дистрофией R2. Вариативность выраженности фиброзных изменений в миокарде различных дисферлин-дефицитных мышей и пациентов ставит под сомнение облигатность данного морфологического признаки. 

Полученные данные позволяют расширить представления о механизмах развития кардиомиопатии при дисферлинопатии.

×

About the authors

Maria A. Savelyeva

North-Western State Medical University named after I.I. Mechnikov

Author for correspondence.
Email: savelyeva.mariaanat@yandex.ru
ORCID iD: 0009-0008-5667-115X
SPIN-code: 9935-5416

medical student

Russian Federation, 195067, Russia, Saint Petesrburg, Piskarevskij prospect, 47

Sergey N. Bardakov

Military Medical Academy

Email: epistaxis@mail.ru
ORCID iD: 0000-0002-3804-6245
SPIN-code: 2351-4096

Cand. Med. Sci., medical captain, lecturer of nervous diseases

Russian Federation, 194044, Saint Petersburg, Academica Lebedeva street, 37

Alexey M. Emelin

North-Western State Medical University named after I.I. Mechnikov

Email: eamar40rn@gmail.com
ORCID iD: 0000-0003-4109-0105
SPIN-code: 5605-1140

assistant of pathological anatomy department of North-Western State Medical University named after I.I. Mechnikov

195067, Russia, Saint Petesrburg, Piskarevskij prospect, 47

Roman V. Deev

Federal State Budgetary Research Institution «Russian research center of surgery named after academician B.V. Petrovsky»

Email: romdey@gmail.com
ORCID iD: 0000-0001-8389-3841
SPIN-code: 2957-1687

assistant director of Federal State Budgetary Research Institution «Russian research center of surgery named after academician B.V. Petrovsky»

Russian Federation, 119435, Moscow, Abrikosovskiy alley, 2

References

  1. Straub V., Murphy A., Udd B. LGMD workshop study group. 229th ENMC international workshop: Limb girdle muscular dystrophies - Nomenclature and reformed classification Naarden, the Netherlands, 17-19 March 2017. Neuromuscular Disorders. 2018 Aug;28(8):702-710. doi: 10.1016/j.nmd.2018.05.007.
  2. Mah J.K., Korngut L., Fiest K.M., et al. A Systematic Review and Meta-analysis on the Epidemiology of the Muscular Dystrophies. The Canadian journal of neurological sciences. Le journal canadien des sciences neurologiques. 2016 Jan;43(1):163-77. doi: 10.1017/cjn.2015.311.
  3. Umakhanova Z.R., Bardakov S.N., Mavlikeev M.V., et al. Twenty-Year Clinical Progression of Dysferlinopathy in Patients from Dagestan. Frontiers in neurology. 2017; 8: 77. doi: 10.3389/fneur.2017.00145
  4. Bashir R., Strachan T., Keers S., et al. A gene for autosomal recessive limb-girdle muscular dystrophy maps to chromosome 2p. Human molecular genetics. 1994; 3(3): 455-457. doi: 10.1093/hmg/3.3.455
  5. Folland C., Johnsen R., Botero Gomez A., et al. Identification of a novel heterozygous DYSF variant in a large family with a dominantly-inherited dysferlinopathy. Neuropathology and applied neurobiology. 2022; 48(7): e12846. doi: 10.1111/nan.12846
  6. Bulankina A.V., Thoms S. Functions of Vertebrate Ferlins. Cells. 2020; 9(3): 534-601. doi: 10.3390/cells9030534
  7. Anderson L.V., Davison K., Moss J.A., et al. Dysferlin is a Plasma Membrane Protein and is Expressed Early in Human Development. Human Molecular Genetics. 1999; 8(5): 855-861. doi: 10.1093/hmg/8.5.855
  8. Chernova O.N. Osobennosti stroeniya i reparativnogo gistogeneza poperechnopolosatoj skeletnoj myshechnoj tkani u myshej s geneticheski obuslovlennym deficitom disferlina. 1.5.22. Kletochnaya biologiya. 30.11.2021, Federal'noe gosudarstvennoe byudzhetnoe nauchnoe uchrezhdenie «Institut eksperimental'noj mediciny».
  9. Ho M., Post C.M., Donahue L.R., et al. Disruption of muscle membrane and phenotype divergence in two novel mouse models of dysferlin deficiency. Human molecular genetics. 2004; 13(18): 1999-2010. doi: 10.1093/hmg/ddh212
  10. Cárdenas A.M., González-Jamett A.M., Cea L.A, et al. Dysferlin function in skeletal muscle: Possible pathological mechanisms and therapeutical targets in dysferlinopathies. Experimental Neurology. 2016; 283: 246-254. doi: 10.1016/j.expneurol.2016.06.026
  11. Gayathri N., Alefia R., Nalini A., et al. Dysferlinopathy: spectrum of pathological changes in skeletal muscle tissue. Indian journal of pathology & microbiology. 2011; 54(2): 350-354. doi: 10.4103/0377-4929.81636
  12. Hofhuis J., Bersch K., Büssenschütt R., et al. Dysferlin mediates membrane tubulation and links T-tubule biogenesis to muscular dystrophy. Journal of cell science. 2017; 130(5): 841-852. doi: 10.1242/jcs.198861
  13. Hornsey M.A., Laval S.H., Barresi R., et al. Muscular dystrophy in dysferlin-deficient mouse models. Neuromuscular Disorders. 2013; 23(5): 377-387. doi: 10.1016/j.nmd.2013.02.004
  14. Chase T.H., Cox G.A., Burzenski L. Dysferlin deficiency and the development of cardiomyopathy in a mouse model of limb-girdle muscular dystrophy 2B. The American journal of pathology. 2009; 175(6): 2299-2308. doi: 10.2353/ajpath.2009.080930
  15. Han R., Bansal D., Miyake K., et al. Dysferlin-mediated membrane repair protects the heart from stress-induced left ventricular injury. The Journal of clinical investigation. 2007; 117(7): 1805-1813. doi: 10.1172/JCI30848
  16. Nishikawa A., Mori-Yoshimura M., Segawa K., et al. Respiratory and cardiac function in japanese patients with dysferlinopathy. Muscle & nerve. 2016; 53(3): 394-401. doi: 10.1002/mus.24741
  17. Tan S.M.L., Ong C.C., Tan K.B., et al. Subclinical Cardiomyopathy in Miyoshi Myopathy Detected by Late Gadolinium Enhancement Cardiac Magnetic Resonance Imaging. International heart journal. 2021; 62(1): 186-192. doi: 10.1536/ihj.20-354
  18. Korzhevskij D.E., Gilyarov A.V. Osnovy gistologicheskoj tekhniki. Sankt-Peterburg: SpecLit, 2010. – 95 s. (In Russ).
  19. Mavlikeev M.O. Kratkij kurs gistologicheskoj tekhniki. Uchebno-metodicheskoe posobie / M.O. Mavlikeev, Arhipova S.S., CHernova O.N., Titova A.A., Pevnev G.O., SHafigullina A.K., Kiyasov A.P. – Kazan': Kazanskij universitet, 2020. – 107 s. (In Russ).
  20. Øyvind Hammer D.A.T.H., Paul D. Ryan. PAST: Paleontological Statistics Software Package for Education and Data Analysis. 2001: http://palaeo-electronica.org/.
  21. Kraemer H.C., Kupfer D.J. Size of Treatment Effects and Their Importance to Clinical Research and Practice. Biological Psychiatry. 2006; 59(11): 990-996. doi: 10.1016/j.biopsych.2005.09.014
  22. Coe R. Effect size calculator. Cambridge CEM, 2000. https://lbecker.uccs.edu/
  23. Wenzel K., Geier C., Qadri F., et al. Dysfunction of dysferlin-deficient hearts. Journal of molecular medicine (Berlin, Germany). 2007; 85(11): 1203-1214. doi: 10.1007/s00109-007-0253-7
  24. Bonda T.A., Szynaka B., Sokołowska M., et al. Remodeling of the intercalated disc related to aging in the mouse heart. Journal of cardiology. 2016; 68(3):261-268. doi: 10.1016/j.jjcc.2015.10.001
  25. Hofhuis J., Bersch K., Wagner S., et al. Dysferlin links excitation-contraction coupling to structure and maintenance of the cardiac transverse-axial tubule system. Europace. 2020; 22(7): 1119-1131. doi: 10.1093/europace/euaa093
  26. Maier L.S., Bers D.M. Calcium, calmodulin, and calcium-calmodulin kinase II: heartbeat to heartbeat and beyond. Journal of molecular and cellular cardiology 2002; 34(8): 919–939. doi: 10.1006/jmcc.2002.2038
  27. Shevchenko Yu.L., Plotnitsky A.V., Sudilovskaya V.V., et al. The morphology and markers of the immobilizing interstitial fibrosis of the heart. Vestnik Nacional'nogo mediko-hirurgicheskogo Centra im. N. I. Pirogova. 2022; 17(3): 84-93. doi: 10.25881/20728255_2022_17_3_84
  28. Wei B., Wei H., Jin J.P. Dysferlin deficiency blunts β-adrenergic-dependent lusitropic function of mouse heart. The Journal of physiology. 2015; 593(23): 5127–5144. doi: 10.1113/JP271225
  29. Suzuki N., Takahashi T., Suzuki Y., et al. An autopsy case of a dysferlinopathy patient with cardiac involvement. Muscle & nerve. 2012; 45(2): 298-299. doi: 10.1002/mus.22247
  30. Choi E.R., Park S.-J., Choe Y.H., et al. Early detection of cardiac involvement in Miyoshi myopathy: 2D strain echocardiography and late gadolinium enhancement cardiovascular magnetic resonance. Journal of cardiovascular magnetic resonance: official journal of the Society for Cardiovascular Magnetic Resonance. 2010; 12(1): 31. doi: 10.1186/1532-429X-12-31

Supplementary files

Supplementary Files
Action
1. JATS XML
Download

Copyright (c) Eco-Vector


СМИ зарегистрировано Федеральной службой по надзору в сфере связи, информационных технологий и массовых коммуникаций (Роскомнадзор).
Регистрационный номер и дата принятия решения о регистрации СМИ: № 0110212 от 08.02.1993.

This website uses cookies

You consent to our cookies if you continue to use our website.

About Cookies