Kidney morphology in INSRR gene knockout mice under bicarbonate loading conditions

  • Authors: Gantsova E.A.1, Serova O.V.2, Deyev I.Y.2, Elchaninov A.V.3, Fatkhudinov T.K.3
  • Affiliations:
    1. Avtsyn Research Institute of Human Morphology of Federal state budgetary scientific institution "Petrovsky National Research Centre of Surgery"
    2. Институт биоорганической химии им. академика М.М. Шемякина и Ю.А. Овчинникова Российской академии наук, Москва, Российская Федерация
    3. Научно-исследовательский институт морфологии человека имени А.В. Авцына Федерального государственного бюджетного научного учреждения «Национальный исследовательский центр хирургии имени академика Б.В. Петровского», Москва, Российская Федерация
  • Section: Original Study Articles
  • Submitted: 21.09.2024
  • Accepted: 21.12.2024
  • Published: 02.05.2025
  • URL: https://j-morphology.com/1026-3543/article/view/636307
  • DOI: https://doi.org/10.17816/morph.636307
  • ID: 636307


Cite item

Full Text

Open Access Open Access
Restricted Access Access granted
Restricted Access Subscription or Fee Access

Abstract

Background. Insulin receptor related receptor tyrosine kinase (IRR) acts as a sensor of extracellular alkaline pH and is involved in renal bicarbonate excretion. High levels of IRR are found in the kidneys, especially in β-intercalated cells located in the distal tubules where bicarbonate secretion occurs. To describe a new cell model for studying pH sensitivity, a unique strain of mice with the insrr gene deletion based on the C57BL/6 strain was developed.

Aim: to identify changes in histological sections of the kidney in mice with the insrr gene knockout, in comparison with wild-type animals, additionally comparing normal conditions and conditions of metabolic alkalization.

Methods. The study used mice of the same generation (littermates); the genotype was confirmed by PCR. The experiment involved two mouse strains: insrr gene knockout (KO) and wild type (WT), under two conditions: normal conditions and experimental alkalosis. The kidneys, the object of study, were subjected to hematoxylin-eosin staining, immunohistochemical staining to assess the macrophages population. The obtained data were assessed using morphometric counting and statistical analysis.

Results. The study showed that insrr gene knockout does not cause pathological changes in the kidney structure. Morphometric analysis revealed differences in the parenchyma thickness, the area of ​​the renal corpuscle, and the diameter of the collecting duct at the level of the renal pelvis. These differences were observed both when comparing normal conditions and under experimental alkalosis. The kidney size in knockout mice was smaller than in wild type mice. As a result of immunohistochemical analysis, no significant changes were observed in the number of α- and β-intercalated cells or CD206+ macrophages, either under normal conditions or in the alkalosis model.

Conclusion. Knockout of the IRR receptor tyrosine kinase gene did not lead to any pathological changes in the kidney structure, but this model can be further used for physiological and molecular biological studies.

Full Text

Введение

Кислотно-щелочной баланс является важным элементом гомеостаза и обеспечивает жесткий контроль как внеклеточного, так и внутриклеточного pH. Отклонения от нормы, такие как ацидоз или алкалоз, могут серьезно повредить организм, поэтому в клетках существуют компенсаторные механизмы, активируемые различными белками [1]. Для изучения этих процессов используют животные модели, в частности мышей.  Рецептор, подобный рецептору инсулина (далее IRR) – рецепторная тирозинкиназа, входящая в семейство рецептора инсулина. Характерная особенность этих рецепторов их предимеризованное состояние, при контакте с лигандом происходят конформационные изменения и активация за счет автофосфорилирования [2]. Обычно лигандами являются крупные белковые молекулы, однако для IRR до сих пор не установлен подобный лиганд. В 2011 году было показано [3], что IRR является pH-сенсором слабощелочной внеклеточной среды, и способен к автофосфорилированию при увеличении pH внеклеточной среды выше 7.9. Многие вопросы о функции этой рецепторной тирозинкиназы в различных органах остаются открытыми, если рецепторы IR и IGF-IR широко представлены практически во всех тканях организма, то локализация IRR ограничена поджелудочной железой, почками, желудком и определенными типами клеток в нервной системе [4]. Описан фенотип нарушения выведения бикарбоната с мочой у мышей [5], нокаутных по гену, кодирующему рецептор IRR – insrr.  Таким образом, нокаут гена в мышах может послужить моделью для исследования щелочной терапии и метаболического алкалоза. Уже известно, что клинические испытания на пациентах с хронической болезнью почек (ХБП) поставили вопрос о возможном терапевтическом использовании бикарбоната натрия (NaHCO3). За последние два десятилетия возник интерес к использованию NaHCO3 для предотвращения негативных последствий ацидоза у пациентов с ХБП. Некоторые клинические и фундаментальные научные исследования продемонстрировали благотворное влияние NaHCO3 на замедление снижения функциональности почек [6–9]. Однако физиологические механизмы, посредством которых бикарбонатная нагрузка защищает почки, остаются неясными. Использование моделей животных дает возможность проводить более целенаправленные интервенционные исследования для выявления механизмов, которые могут опосредовать защиту почек под действием щелочи [10].

            Моделью исследования стала почка мыши с нокаутом гена insrr-/- в сравнении с диким типом, дополнительно исследовали два состояния животных – норму и бикарбонатную нагрузку. Целью исследования стало определение изменений на гистологических срезах почки животных двух генотипов в двух условиях.  Для этого провели морфологическую оценку состояния почки у нокаутных по рецептору IRR мышей в условиях физиологической нормы и при алкалозе и исследовали популяцию макрофагов в почке.

Этические аспекты исследования

Эксперименты над животными были проведены в соответствии с рекомендациями ARRIVE Guideline [11]. Нормативный документ, регулирующий эксперименты с животными – выписка из протокола заседания Локального этического комитета №8 от 29 сентября 2023 г. ФГБНУ «РНЦХ им. Акад. Б.В. Петровского»

Материалы и методы

Генотипирование. Для генотипирования мышей использовали метод ПЦР, в качестве матрицы для которого брали геномную ДНК. Эту ДНК использовали как матрицу для ПЦР на дикую и нокаутную аллель, в качестве праймеров для нокаутной аллели использовали праймеры KO_irr1_new и KO_irr2_new; для дикой аллели – mWT3_new и mWT4_new. Каждый образец геномной ДНК ставили с каждой парой праймеров и тремя контролями (вода, известная WT, известная KO). Параметры реакции: 32 цикла, предварительная денатурация 95 °С 3 мин 30 сек, денатурация 95 °С 45 сек, отжиг 60 °С 45 сек, элонгация 72 °С 30 сек, финальная достройка 72 °С 7 мин. Продукты ПЦР около 300 пар оснований детектировали на агарозном форезе, результаты детектировали на трансиллюминаторе Vilber Lourmat.

Последовательности праймеров для генотипирования:

  • mwt3_new 5’-GCAAGCTACACAGGCTCGAGGG-3’
  • mwt4_new 5’-TGGGTTCTGATCCTCTCAAGGAG-3’
  • KO_irr2_new 5’-CAAAACCAAATTAAGGGCCAGCTC-3’
  • KO_irr1_new 5’-AGCCTGAAGACCCTCGTCGACT-3’

Условия щелочной нагрузки, подготовка образцов. Лабораторные животные содержались в виварии, со свободным доступом к еде и питью, соотношение светлого и темного времени суток 1:1 (12 ч). Для эксперимента были взяты два генотипа животных – дикий тип и нокаут insrr-/- в двух условиях. При нормальных условиях в качестве питья мышам давали обычную воду, а при условиях щелочной нагрузки в воду для питья мышей добавляли бикарбонат натрия NaHCO3 в концентрации 250 мМ (pH=8,5). Таким образом, были сформированы 4 группы животных, n = 4, всего 16 животных. Животные дикого типа в нормальных условиях (WT_water), и в условиях щелочной нагрузки (WT_bicarb), нокаутные животные в нормальных условиях (KO_water) и в условиях щелочной нагрузки (KO_bicarb). Щелочная нагрузка проводилась в течение 7 дней, перед извлечением органов за 12 часов у мышей убиралась пища, но не питье, для выравнивания метаболического уровня животных. В эксперимент брали самок одного возраста, 3-4 мес. При выделении органов, животных усыпляли с помощью анестезирующих препаратов, золетил 20 мг/кг, ксилазин 5 мг/кг в 0,9 % растворе NaCl. Затем эвтаназировали методом цервикальной дислокации. Почку извлекали из брюшной полости, промывали в стерильном растворе PBS и далее, переносили на -80℃.

Обзорное окрашивание гематоксилином и эозином. Для визуализации гистологического строения почки, подготовили ткань почки для изучения, сделав тонкие срезы толщиной около 5-10 мкм с помощью криотома Leica CM-1050 (Leica Microsystems, Germany), фиксировали срезы образцов в 10% нейтральном буферном формалине, затем окрашивали 1% раствором гематоксилина в течение 5-10 минут, отмывали водой и окрашивали раствором эозина в течение 1-2 минут. Проводили срезы через ряд этанолов различных концентраций (70%, 80%, 95%, 100%) для дегидратации, затем в ксилоле для просветления и заключали CV Mount (Leica Microsystems, Germany). Подготовленные срезы анализировали с использованием микроскопа Leica DMI8 (Leica Microsystems, Germany).

Для визуализации макрофагов срезы почек инкубировали в 0,05% БСА, в течение 2 ч с последующей инкубацией в течение ночи во влажной камере при 4 °С с первичными антителами CD86 1:500 (Abcam, UK) и CD206 1:500 (Abcam, UK). Затем инкубировали со вторичными антителами анти-кроличьи, конъюгированными с FITC (1:1000) и DAPI (1:1000). Срезы снова трижды промывали PBS, а затем помещали в Glycergel Mounting Medium (Dako, USA).

Морфометрия срезов почек. Подсчет различных типов вставочных клеток, определение площади почечного тельца, толщины коркового и мозгового вещества с помощью программы Image Scope M (СМА, Россия). Цифровые изображения гистологических срезов почечной ткани загружали в программу, используя инструменты программы Image Scope M, проводили анализ срезов почек мышей.  Полученные данные подвергали статистической обработке с помощью программы Prism 8 (GraphPad Software, USA).

Результаты

Использование животной модели с нокаутом гена insrr позволяет пролить свет на некоторые взаимодействия этого рецептора с другими pH-чувствительными белками и более детально изучить механизм регуляции кислотно-щелочного баланса в организме. В этой работе внимание сконцентрировано на почке мыши, как на объекте исследования. Доказанное нарушение секреции бикарбоната в мочу при индуцированном алкалозе у нокаутных животных [13] является важным физиологическим наблюдением и свидетельствует о наличии компенсаторного механизма регуляции в почках. Линия мышей, нокаутных по гену insrr была получена ранее, и исследована в работах T. Kitamura и S. Nef [14, 15]. В них рассмотрены поджелудочная железа и репродуктивная система, описанные фенотипы связаны с этими системами органов, почка не являлась объектом их исследования. Во всех экспериментах, описанных в данной работе, использовали строго мышей одного поколения (литтермейтсов), самок одного возраста (3-4 месяца). При получении потомства первого поколения гетерозигот проводили проверку генотипа методом ПЦР с геномной ДНК мышей, продукт детектировали с помощью электрофореза в агарозном геле. Для определения наличия нокаутной аллели использовали праймеры KO_irr1 и KO_irr2, для дикой аллели – mWT3 и mWT4.

Для определения влияния нокаута гена рецепторной тирозинкиназы IRR на строение почек было проведено обзорное окрашивание гематоксилином и эозином крио срезов почек мышей. Отличия в микроскопической структуре коркового и мозгового вещества, а также частей нефронов, выявленные при морфометрической оценке поперечных срезов почек на уровне почечной лоханки, окрашенных гематоксилин-эозином. В результате анализа срезов с помощью микроскопии обнаружили, что паренхима почек животных дикого типа, как в нормальных условиях, так и при моделировании алкалоза была разделена на корковое и мозговое вещество. В корковом веществе обнаруживали почечные тельца, окруженные проксимальными и дистальными извитыми канальцами. Почечные тельца были структурированы, полость капсулы хорошо заметна. Стенка проксимальных извитых канальцев образована однослойным кубическим эпителием с хорошо выраженной щеточной каемкой, просвет проксимальных канальцев узкий. Стенка дистальных извитых канальцев образована однослойным кубическим эпителием, щеточная каемка отсутствовала, просвет хорошо контурирован. Мозговое вещество почек было представлено в основном собирательными трубочками и тонкими канальцами. Собирательные трубочки с выраженным просветом, стенка образована высоким призматическим эпителием. Тонкие канальца имели четкие контуры, стенка образована плоскими эпителиоцитами. На гистологических срезах почек нокаутных животных, как в условиях нормы, так и при моделировании алкалоза наблюдали строение типичной паренхимы почек. Таким образом, можно сделать вывод, что нокаут гена insrr не приводил к какому-либо патологическому нарушению строения почек. После получения изображений почечных тканей, проводили измерение площади каждого почечного тельца и толщины коркового и мозгового вещества с помощью специализированных инструментов анализа изображений.

При морфометрической оценке поперечных срезов почек на уровне почечной лоханки, окрашенных гематоксилин-эозином (см. рисунок 1), были обнаружены различия в толщине паренхимы, а также площади почечного тельца и диаметра собирательной трубочки. При оценке толщина паренхимы почек, на горизонтальных срезах почек в программе Image Scope M откладывали отрезки, соответствующие толщине паренхимы. На рисунке 2 показаны численные отличия морфометрических показателей почек животных двух генотипов в разных условиях. После оценки численного отношения паренхимы почки к общему диаметру горизонтального среза обнаружили отличия у нокаутных животных. Достоверное изменение значений толщины паренхимы у нокаутных мышей в условиях экспериментального алкалоза при сравнении с мышами дикого типа (см. рис. 2А). При этом в условиях моделирования алкалоза происходит увеличение толщины паренхимы как у нокаутных животных, так и у животных дикого типа.  Такие же измерения провели для измерения площади почечных клубков. Общую площадь среза оценивали в программе Image Scope M и сравнивали с площадью почечных клубочков. При сравнении двух генотипов обнаружили значительное увеличение площади почечных клубков у животных дикого типа в нормальных условиях по сравнению с нокаутными мышами в условиях щелочного pH (см. рис. 2Б). Нокаут гена insrr не приводил к изменению площади почечного тельца, однако показано, что моделирования алкалоза приводила к значимому увеличению его площади. Дополнительно было проведено измерение ширины просвета собирательных трубочек, для обоих условий – нормальные условия и экспериментальный алкалоз у животных обоих генотипов. Наблюдали значительное увеличение ширины просвета собирательных трубочек у животных дикого типа в нормальных условиях, нежели в случае с этим же генотипом при щелочной нагрузке. Однако животные дикого типа демонстрируют больший просвет собирательных трубочек, чем нокаутные по гену insrr (см.  рис. 2В). В целом, размер почек у нокаутных мышей оказался меньше, чем у мышей дикого типа.

Рисунок 1 – Окрашивание почек гематоксилином-эозином, увеличение 20х. А – WT (insrr+/+) в нормальных условиях, Б – WT (IRR+/+) в условиях бикарбонатной нагрузки, В – KO (insrr –/–) в нормальных условиях, Г – KO (insrr –/–) в условиях бикарбонатной нагрузки. Масштабная линейка – 100 мкм.

Рисунок 2 – Морфометрическая характеристика почек. А – толщина паренхимы, мкм, Б – площадь почечного тельца, мкм 2, В – диаметр собирательных трубочек, мкм. Данные представлены как среднее±стандартное отклонение, * - статистически значимые различия, p<0,05. Сходные данные были получены и при изучении диаметра собирательных трубочек. Увеличение pH питьевой воды с помощью бикарбоната, приводило к увеличению диаметра собирательных трубочек у животных дикого типа, при этом диаметр собирательной трубочки почки животных дикого типа был значимо больше, чем диаметр собирательных трубочек в почках нокаутных животных в условиях алкалоза.

Активность макрофагов определяется множеством факторов [16]. В настоящее время установлено, что рН является одним из механизмов, посредством которого определяется про-или противовоспалительное состояние макрофагов [17]. Популяцию макрофагов почек изучали с помощью определения маркерного белка провоспалительных макрофагов – CD86, а также маркерного белка противововспалительного макрофага – CD206.  Макрофаги, экспрессирующие указанные маркеры, распределены неравномерно между корковым и мозговым веществом. Макрофаги, положительные по CD86 ассоциированы в основном только с почечными тельцами, внутри которых они образовывали сложную сеть, что затрудняло их количественную оценку (см. рисунок 3).

Рисунок 3 – Иммуногистохимическое исследование маркера макрофагов CD86. А – WT (insrr +/+) в нормальных условиях, Б – WT (insrr +/+) в условиях бикарбонатной нагрузки, В – KO (insrr –/–) в нормальных условиях, Г – KO (insrr –/–) в условиях бикарбонатной нагрузки. Зеленое свечение – FITC, ядра докрашены DAPI (синее свечение). Увеличение ×20, масштабная линейка – 50 мкм

Рисунок 4 – Иммуногистохимическое исследование маркера макрофагов CD206. А – WT (insrr +/+) в нормальных условиях, Б – WT (insrr +/+) в условиях бикарбонатной нагрузки, В – KO (insrr –/–) в нормальных условиях, Г – KO (insrr –/–) в условиях бикарбонатной нагрузки. Зеленое свечение – FITC, ядра докрашены DAPI (синее свечение). Увеличение ×20, масштабная линейка – 50 мкм.

CD206+ макрофаги встречались как в корковом, так и в мозговом веществе. При этом как в корковом, так и мозговом веществе данный типа макрофагов ассоциирован со стенкой канальцев (pис. 4), в корковом веществе CD206+ макрофаги также обнаруживались в почечном тельце. Количественная оценка CD206+ макрофагов, ассоциированных с почечными канальцами, не выявила статистически значимых различий между почками животных дикого типа и нокаутными животными, как в нормальных условиях, так и при моделировании алкалоза (рис. 5).

Рисунок 5 – Количество CD206 макрофагов в почке нокаутных животных и животных дикого типа по данным иммуногистохимического исследования. WT (insrr +/+) – почки животных дикого типа, KO (insrr –/–) – почки нокаутных животных, представлены средние значения±стандартное отклонение.

Обсуждение

Из проведенного исследования с помощью микроскопии и морфометрической оценки поперечных срезов почек на уровне почечной лоханки, окрашенных гематоксилином-эозином, видно, что нокаут гена рецепторной тирозинкиназы IRR не привел к каким-либо патологическим нарушениям в строении почек. Собирательные трубочки у животных дикого типа имели больший просвет, чем у нокаутных мышей по гену insrr.  При этом бикарбонатная нагрузка приводила к увеличению просвета собирательных трубочек у insrr-/- животных. Вероятно, щелочная нагрузка изменяет клеточный профиль собирательного протока, что может включать пролиферацию клеток и изменения экспрессии рецепторов апикальной мембраны протока [18].

Нокаут данного гена не привел к изменению площади почечного тельца, однако в диком типе при экспериментальном алкалозе площадь клубочка значительно увеличивается. Увеличение площади клубочков связывают с гломерулярной гипертензией и гиперфильтрацией [19]. Изменение площади клубочка при алкалозе может быть связано с глюкозно-натриевым транспортером SGLT2, так как изменения экспрессии этого гена наблюдались при нокауте IRR [20], влияние которого на нарушение кислотно-щелочного гомеостаза в почке делают его активно изучаемой мишенью для веществ-ингибиторов [21]. Эти вещества вызывают снижение площади клубочков, вызванных нарушением функции SGLT2 [22]. При оценке толщины паренхимы почек в ходе моделирования алкалоза было выявлено увеличение толщины паренхимы как у нокаутных животных, так и у животных дикого типа. Увеличение толщины паренхимы связывают с острым повреждением почек [23], а уменьшение толщины с хронической болезнью почек [24]. Вероятно, изменение морфологии почек мышей является предвестником начинающегося патологического изменения.

Конечная оценка говорит о том, что размер почек у нокаутных мышей оказался меньше, чем у мышей дикого типа. Эти результаты могут свидетельствовать о возможном влиянии нокаута гена insrr на размер и функционирование почек, однако требуются дополнительные исследования для точного понимания механизмов данного влияния. Возможно использование данной животной модели для изучения влияния транспорта бикарбоната, либо для моделирования метаболического алкалоза и изучение его влияния на организм. В целом, нокауты генов, ответственных за транспорт ионов в почке являются широко распространенной темой и представляют ценность для моделирования тех или иных патологических состояний [25]. Так, например, у мышей, нокаутных по натрий-протонному NHE3-транспортеру, нарушен водный баланс и осмоляльность мочи [26]. Нокауты некоторых ионных каналов, например котранспортера NaK2Cl (NKCC2) и калиевого транспортера ROMK, вызывают почечную недостаточность и гидронефроз, несовместимые с жизнью животных [27, 28].  

Благодаря наступлению «эпохи нокаутов» появляются новые знания о физиологии почки, в том числе и о молекулярной физиологии. С помощью методов клонирования и генетической модификации генов, получены ответы на вопросы о регуляции кислотно-щелочного баланса в почках. Авторы надеются, что животные, нокаутные по гену рецепторной тирозинкиназы IRR, окажутся моделью для изучения подобных молекулярных и клеточных механизмов в будущем.

×

About the authors

Elena Aleksandrovna Gantsova

Avtsyn Research Institute of Human Morphology of Federal state budgetary scientific institution "Petrovsky National Research Centre of Surgery"

Email: gantsova@mail.ru
ORCID iD: 0000-0003-4925-8005
SPIN-code: 6486-5795
Scopus Author ID: 56550044300

Младший научный сотрудник лаборатории роста и развития НИИ МЧ РНЦХ им. Петровского

Russian Federation, Г. Москва, ул. Цюрупы 3

Oxana Viktorovna Serova

Институт биоорганической химии им. академика М.М. Шемякина и Ю.А. Овчинникова Российской академии наук, Москва, Российская Федерация

Email: oxana.serova@gmail.com
ORCID iD: 0000-0002-4941-8913

Igor Yevgenievich Deyev

Институт биоорганической химии им. академика М.М. Шемякина и Ю.А. Овчинникова Российской академии наук, Москва, Российская Федерация

Email: deyevie@gmail.com

Andrey Vladimirovich Elchaninov

Научно-исследовательский институт морфологии человека имени А.В. Авцына Федерального государственного бюджетного научного учреждения «Национальный исследовательский центр хирургии имени академика Б.В. Петровского», Москва, Российская Федерация

Email: elchandrey@yandex.ru

Заведующий лабораторией роста и развития НИИ МЧ РНЦХ им. Петровского

Timur Khaisamudinovich Fatkhudinov

Научно-исследовательский институт морфологии человека имени А.В. Авцына Федерального государственного бюджетного научного учреждения «Национальный исследовательский центр хирургии имени академика Б.В. Петровского», Москва, Российская Федерация

Author for correspondence.
Email: fatkhudinov_tkh@pfur.ru

References

  1. Gantsova E. et al. Mechanisms and physiological relevance of acid-base exchange in func-tional units of the kidney // PeerJ. PeerJ Inc., 2024. Vol. 12. P. e17316.
  2. Korotkova D.D. et al. Insulin receptor-related receptor regulates the rate of early develop-ment in Xenopus laevis // Int J Mol Sci. MDPI, 2022. Vol. 23, № 16. P. 9250.
  3. Deyev I.E. et al. Insulin receptor-related receptor as an extracellular alkali sensor // Cell Metab. 2011. Vol. 13, № 6. P. 679–689.
  4. Serova O. V et al. The value of pH sensors in maintaining homeostasis of the nervous sys-tem // Russ J Bioorg Chem. Pleiades Publishing, 2020. Vol. 46. P. 506–519.
  5. Petrenko A.G. et al. Insulin receptor-related receptor as an extracellular pH sensor involved in the regulation of acid–base balance // Biochimica et Biophysica Acta (BBA) - Proteins and Proteomics. Elsevier, 2013. Vol. 1834, № 10. P. 2170–2175.
  6. Alva S.M. et al. A Study on Effect of Bicarbonate Supplementation on the Progression of Chronic Kidney Disease // Indian J Nephrol. Indian J Nephrol, 2020. Vol. 30, № 2. P. 91–97.
  7. Dubey A.K. et al. Correction of metabolic acidosis improves muscle mass and renal function in chronic kidney disease stages 3 and 4: a randomized controlled trial // Nephrol Dial Transplant. Nephrol Dial Transplant, 2020. Vol. 35, № 1. P. 121–129.
  8. Di Iorio B.R. et al. Treatment of metabolic acidosis with sodium bicarbonate delays progres-sion of chronic kidney disease: the UBI Study // J Nephrol. J Nephrol, 2019. Vol. 32, № 6. P. 989–1001.
  9. Goraya N. et al. Fruit and Vegetable Treatment of Chronic Kidney Disease-Related Metabol-ic Acidosis Reduces Cardiovascular Risk Better than Sodium Bicarbonate // Am J Nephrol. Am J Nephrol, 2019. Vol. 49, № 6. P. 438–448.
  10. Mannon E.C., O’Connor P.M. Alkali supplementation as a therapeutic in chronic kidney dis-ease: What mediates protection? // Am J Physiol Renal Physiol. American Physiological So-ciety, 2020. Vol. 319, № 6. P. F1090–F1104.
  11. Percie Du Sert N. et al. The ARRIVE guidelines 2.0: Updated guidelines for reporting animal research // BMC Vet Res. BioMed Central, 2020. Vol. 16, № 1. P. 1–7.
  12. Mumtaz R. et al. Intercalated Cell Depletion and Vacuolar H+-ATPase Mistargeting in an Ae1 R607H Knockin Model // Journal of the American Society of Nephrology. American Society of Nephrology, 2017. Vol. 28, № 5. P. 1507–1520.
  13. Deyev IE et al. Deficient response to experimentally induced alkalosis in mice with the inac-tivated insrr gene // Acta Naturae (англоязычная версия). Общество с ограниченной от-ветственностью Парк-медиа, 2011. Vol. 3, № 4 (11). P. 2011.
  14. Kitamura T. et al. Preserved Pancreatic β-Cell Development and Function in Mice Lacking the Insulin Receptor-Related Receptor // Mol Cell Biol. American Society for Microbiology (ASM), 2001. Vol. 21, № 16. P. 5624.
  15. Neirijnck Y., Papaioannou M.D., Nef S. The insulin/IGF system in mammalian sexual de-velopment and reproduction // Int J Mol Sci. 2019. Vol. 20, № 18.
  16. Chen S. et al. Macrophages in immunoregulation and therapeutics.
  17. Wu H. et al. Effects of Environmental pH on Macrophage Polarization and Osteoimmuno-modulation // ACS Biomater Sci Eng. American Chemical Society, 2019. Vol. 5, № 10. P. 5548–5557.
  18. Genini A. et al. Adaptive response of the murine collecting duct to alkali loading // Pflugers Arch. Pflügers Archiv - European Journal of Physiology, 2020. Vol. 472, № 8. P. 1079–1092.
  19. Tobar A. et al. Proximal Tubular Hypertrophy and Enlarged Glomerular and Proximal Tubu-lar Urinary Space in Obese Subjects with Proteinuria // PLoS One. Public Library of Science, 2013. Vol. 8, № 9. P. e75547.
  20. Gantsova E.A. et al. A Comparative Kidney Transcriptome Analysis of Bicarbonate-Loaded insrr-Null Mice // Curr Issues Mol Biol. MDPI, 2023. Vol. 45, № 12. P. 9709–9722.
  21. Chen H. et al. SGLT2 Inhibition by Dapagliflozin Attenuates Diabetic Ketoacidosis in Mice with Type-1 Diabetes // Cardiovasc Drugs Ther. Springer, 2022. Vol. 36, № 6. P. 1091–1108.
  22. Lu Y.-P. et al. SGLT2 inhibitors improve kidney function and morphology by regulating re-nal metabolic reprogramming in mice with diabetic kidney disease // J Transl Med. 2022. Vol. 20. P. 420.
  23. Liu C., Wang X. Clinical utility of ultrasonographic evaluation in acute kidney injury // Transl Androl Urol. AME Publishing Company, 2020. Vol. 9, № 3. P. 1345355–1341355.
  24. Gupta P. et al. Ultrasonographic predictors in chronic kidney disease: A hospital based case control study // Journal of Clinical Ultrasound. John Wiley & Sons, Ltd, 2021. Vol. 49, № 7. P. 715–719.
  25. Fenton R.A., Knepper M.A. Mouse models and the urinary concentrating mechanism in the new millennium // Physiol Rev. American Physiological Society, 2007. Vol. 87, № 4. P. 1083–1112.
  26. Amlal H. et al. Downregulation of renal AQP2 water channel and NKCC2 in mice lacking the apical Na+-H+ exchanger NHE3 // Journal of Physiology. 2003. Vol. 553, № 2. P. 511–522.
  27. Takahashi N. et al. Uncompensated polyuria in a mouse model of Bartter’s syndrome // Proc Natl Acad Sci U S A. National Academy of Sciences, 2000. Vol. 97, № 10. P. 5434–5439.
  28. Lorenz J.N. et al. Impaired renal NaCl absorption in mice lacking the ROMK potassium channel, a model for type II Bartter’s syndrome // Journal of Biological Chemistry. Elsevier, 2002. Vol. 277, № 40. P. 37871–37880.

Supplementary files

Supplementary Files
Action
1. JATS XML
Download

Copyright (c) Eco-Vector


Периодический печатный журнал зарегистрирован как СМИ Федеральной службой по надзору в сфере связи, информационных технологий и массовых коммуникаций (Роскомнадзор): № 0110212 от 08.02.1993.
Сетевое издание зарегистрировано как СМИ Федеральной службой по надзору в сфере связи, информационных технологий и массовых коммуникаций (Роскомнадзор): ЭЛ № ФС 77 - 84733 от 10.02.2023.