ВЫЯВЛЕНИЕ НЕЙРОНАЛЬНЫХ И ГЛИАЛЬНЫХ АНТИГЕНОВ ПОСЛЕ ДЕКАЛЬЦИНАЦИИ В РАСТВОРЕ МУРАВЬИНОЙ КИСЛОТЫ И ФИКСАЦИИ В ЦИНК-ЭТАНОЛ-ФОРМАЛЬДЕГИДЕ
- Авторы: Колос Е.А.1, Коржевский Д.Э.1
-
Учреждения:
- Научно-исследовательский институт экспериментальной медицины СЗО РАМН
- Выпуск: Том 144, № 4 (2013)
- Страницы: 076-079
- Раздел: Статьи
- URL: https://j-morphology.com/1026-3543/article/view/398706
- DOI: https://doi.org/10.17816/morph.398706
- ID: 398706
Цитировать
Полный текст
Открытый доступ
Доступ предоставлен
Доступ платный или только для подписчиков
Доступ предоставлен
Доступ платный или только для подписчиков
Аннотация
Цель настоящего исследования состояла в определении возможности иммуногистохимического выявления различных тканевых антигенов на парафиновых срезах спинного мозга крысы, окруженного костной тканью позвоночника и прилежащими мышцами, фиксированного в цинк-этанол-формальдегиде после проведения декальцинации муравьиной кислотой у взрослых крыс (n=5) и новорожденных крысят (n=2) линии Вистар. В работе использовали антитела к глиальному фибриллярному кислому белку, нейрофиламентам, к ядерному белку нервных клеток, к тиразингидроксилазе, к белку синаптических пузырьков — синаптофизину и белку промежуточных филаментов — виментину. Сочетание фиксации объектов в цинк-этанол-формальдегиде и декальцинации в 21% растворе муравьиной кислоты обеспечивает оптимальную сохранность изученных антигенов.
Ключевые слова
Полный текст
Об авторах
Елена Андреевна Колос
Научно-исследовательский институт экспериментальной медицины СЗО РАМНлаборатория функциональной морфологии центральной и периферической нервной системы, отдел общей и частной морфологии 197376, Санкт-Петербург, ул. Академика Павлова, 12
Дмитрий Эдуардович Коржевский
Научно-исследовательский институт экспериментальной медицины СЗО РАМН
Email: iemmorphol@yandex.ru
лаборатория функциональной морфологии центральной и периферической нервной системы, отдел общей и частной морфологии 197376, Санкт-Петербург, ул. Академика Павлова, 12
Список литературы
- Коржевский Д. Э., Кирик О. В., Карпенко М. Н. и др. Теоретические основы и практическое применение методов иммуногистохимии: руководство. СПб., СпецЛит, 2012.
- Коржевский Д. Э., Сухорукова Е. Г., Гилерович Е. Г. и др. Преимущества и недостатки цинк-этанол-формальдегида как фиксатора для иммуногистохимических исследований и конфокальной лазерной микроскопии. Морфология, 201, т. 143. вып. 2, с. 81–85.
- Таюшев К. Г. Руководство по лабораторной нейрогистологической технике. СПб., Изд-во Российск. науч.-исслед. нейрохир. института им. проф. А. Л. Поленова, 2005.
- Athanasou N. A., Quinn J., Heryet A. et al. Effect of decalcification agents on immunoreactivity of cellular antigens. J. Clin. Pathol., 1987, v. 40, № 8, p. 874–878.
- Hosoya A., Hoshi K., Sahara N. et al. Effects of fixation and decalcification on the immunohistochemical localization of bone matrix proteins in fresh-frozen bone sections. Histochem. Cell Biol., 2005, v. 123, № 6, p. 639–646.
- Kawamoto Т. and Shimizu М. A method for preparing 2- to 50-мm-thick fresh-frozen sections of large samples and undecalcified hard tissues. Histochem. Cell Biol., 2000, v. 113, № 5, p. 331–339.
- Mori S., Sawai T., Teshima T. et al. A new decalcifying technique for immunohistochemical studies of calcified tissue, especially applicable to cell surface marker demonstration. J. Histochem. Cytochem., 1988, v. 36, № 1, p. 111–114.
- Mullink H., Henzen-Logmans S. C., Tadema T. M. et al. Influence of fixation and decalcification on the immunohistochemical staining of cell-specific markers in paraffin-embedded human bone biopsies. J. Histochem. Cytochem., 1985, v. 33, № 11, p. 1103–1109.
- Ramos-Vara J. A. and Miller M. A. Immunohistochemical identification of canine melanocytic neoplasms with antibodies to melanocytic antigen PNL2 and tyrosinase: comparison with melan A. Vet. Pathol., 2011, v. 48, № 2, p. 443–450.
- Yamamoto-Fukudа T., Shibata Y., Hishikawa Y. et al. Effects of various decalcification protocols on detection of DNA strand breaks by terminal dUTP nick end labelling. Histochem. J., 2000, v. 32, № 11, p. 697–702.