ОЦЕНКА СОСТОЯНИЯ ПЕРИФЕРИЧЕСКИХ НЕРВОВ ПО АКТИВНОСТИ АЦЕТИЛХОЛИНЭСТЕРАЗЫ



Цитировать

Полный текст

Аннотация

Целью исследования явилось установление возможности оценки состояния периферического нерва по активности ацетилхолинэстеразы (АХЭ). В результате серии экспериментов на крысах удалось модифицировать способ выявления активности АХЭ на срезах периферических нервов (приоритетная справка № 2013157128 от 23.12.2013 г.) и показать, что интенсивность реакции зависит от состояния волокон. При атрофических процессах активность фермента снижается, а при прорастании волокон - резко возрастает. Доказано, что используя в качестве критерия интенсивность реакции на АХЭ, можно оценить состояние нерва в течение 1-2 ч, что может быть использовано в дальнейшем во время реконструктивных операций (интраоперационно).

Полный текст

Проблема лечения травматических повреждений периферических нервов сохраняет свою актуальность, поскольку травмы периферических нервов составляют 1,5-6% в структуре всех травм верхних конечностей [1, 4, 5]. Для восстановления функции поврежденных нервов существуют большое количество реконструктивных операций, выполнение которых зачастую требует контроля регенерации нерва [1, 3]. Для этого пользуются исследованием электропроводимости по нерву или перкуссией по ходу нерва (признак Тиннеля), что не всегда является информативным. Для того чтобы в минимально короткое время интраоперационно точно определить состояние нерва, необходимо использовать морфологический экспресс-метод. Разработка таких методов является актуальной проблемой современной реконструктивной хирургии. Целью исследования явилось установление возможности оценки состояния периферического нерва по активности ацетилхолинэстеразы (АХЭ). Работа выполнена на 15 крысах-самцах линии Вистар массой 220-350 г. Активность АХЭ определяли на продольных и поперечных криостатных срезах нервов толщиной 40 мкм авторским методом (приоритетная справка № 2013157128 от 23.12.2013), представляющим собой модификацию метода Карновского-Рутса [2] с измененным составом инкубационной среды, адаптированного к поставленной задаче - оценке состояния травмированного или банкированного на предыдущих этапах операции нерва путем биопсии во время выполнения реконструктивной операции (в течение 1-2 ч). Крысы были разделены на 3 группы: интактные (n=5), крысы через 1 мес после перерезки седалищного нерва (n=5), крысы через 3 мес после сшивания нерва «конец в бок» (n=5). У интактных животных оценивали активность АХЭ на срезах седалищного нерва (рисунок, а). У крыс 2-й группы был удален участок седалищного нерва длиной 5-7 мм. Спустя 1 мес у крыс брали на исследование дистальный и проксимальный по отношению к зоне перерезки фрагменты нерва. У крыс 3-й группы выделяли большеберцовый и малоберцовый нервы, после чего малоберцовый нерв перерезали и производили микрохирургический шов малоберцового нерва к большеберцовому по типу «конец в бок» нитками Нейлон 10/0 [3, 5]. Спустя 3 мес у крыс под уретановым наркозом брали на исследование проксимальный и дистальный участки нервов в месте шва. При взятии материала, манипуляциях с животными, операциях соблюдали «Правила проведения работ с использованием экспериментальных животных». Конечный продукт реакции на АХЭ в интактном нерве определялся в осевых цилиндрах волокон (см. рисунок, г). Миелиновые оболочки не обладают активностью АХЭ. При исследовании нервов у крыс 2-й группы дистальные (см. рисунок, б) и проксимальные (см. рисунок, в) фрагменты перерезанного нерва имели отличия в уровне реакции. Количество АХЭ-позитивных осевых цилиндров (для простоты изложения в дальнейшем - волокон) в дистальном фрагменте нерва было снижено по сравнению с проксимальным и интактными нервами, отражая, по-видимому, атрофические изменения в дистальном отрезке, наблюдаемые при повреждениях. В 3-й группе крыс на срезах фрагмента нерва в месте шва наблюдалось прорастание АХЭ-позитивных волокон (см. рисунок, г), для которых характерно повышение уровня обменных процессов, что проявляется и увеличением активности АХЭ. Таким образом, в результате серии экспериментов удалось показать, что интенсивность реакции на АХЭ в нерве зависит от состояния волокон в нем. При атрофических процессах активность фермента снижается, а при прорастании волокон - резко возрастает. Используя гистохимические критерии оценки состояния нерва по интенсивности реакции, поставленной по авторской прописи, можно оценивать состояние нерва во время реконструктивных операций в течение 1-2 ч.
×

Об авторах

Армен Славикович Карапетян

Ярославская государственная медицинская академия

Email: а2311@inbox.ru
педиатрический факультет 150000, г. Ярославль, ул. Революционная, 5

Татьяна Анатольевна Румянцева

Ярославская государственная медицинская академия

Email: rum-yar@mail.ru
кафедра анатомии человека 150000, г. Ярославль, ул. Революционная, 5

Павел Владимирович Лебедев

Ярославская государственная медицинская академия

Email: paw.lebedeff2011@yandex.ru
педиатрический факультет 150000, г. Ярославль, ул. Революционная, 5

Список литературы

  1. Куринный И. Н. Хирургическое лечение застарелой сочетанной травмы срединного и локтевого нервов: Автореф. дис. … канд. мед. наук. Киев, 1991.
  2. Луппа Х. Основы гистохимии. М., Мир, 1980.
  3. Bontioti E., Kanje M., Lundborg G. and Dahlin LB. End-to-side nerve repair in the upper extremity of rat. J. Peripher. Nerv. Syst., 2005, v. 10, № 1, p. 58-68.
  4. Portincasa A., Gozzo G., Parisi D. et al. Microsurgical treatment of injury to peripheral nerves in upper and lower limbs: a critical review of the last 8 years. Microsurgery, 2007, v. 27, № 5, p. 455-462.
  5. Terzis J. K. An Exciting New Concept in Facial Reanimation. The Facial Nerve. Amsterdam, Kugler & Ghedini Publications, 1988.

Дополнительные файлы

Доп. файлы
Действие
1. JATS XML
Скачать

© Эко-Вектор, 2014


Периодический печатный журнал зарегистрирован как СМИ Федеральной службой по надзору в сфере связи, информационных технологий и массовых коммуникаций (Роскомнадзор): № 0110212 от 08.02.1993.
Сетевое издание зарегистрировано как СМИ Федеральной службой по надзору в сфере связи, информационных технологий и массовых коммуникаций (Роскомнадзор): ЭЛ № ФС 77 - 84733 от 10.02.2023.