Изучение пространственной организации астроцитов головного мозга при помощи конфокальной лазерной микроскопии



Цитировать

Полный текст

Открытый доступ Открытый доступ
Доступ закрыт Доступ предоставлен
Доступ закрыт Доступ платный или только для подписчиков

Аннотация

Объемная реконструкция цитоархитектонических взаимоотношений основных компонентов нервной ткани представляется актуальной, но чрезвычайно сложной проблемой нейроморфологии. Цель настоящего исследования состояла в разработке метода, обеспечивающего четкую визуализацию астроцитов головного мозга крысы в срезах толщиной более 30 мкм, создании адекватного алгоритма изучения полученных препаратов при помощи конфокального микроскопа и проведении трехмерной реконструкции астроцитов по группе оптических срезов. Исследованы различные варианты приготовления препаратов (просветляющие реагенты, флюорохромы, заключающие среды), режимы работы конфокального микроскопа, методы обработки цифрового изображения и др. Рекомендованы методические подходы, которые можно успешно применять при объемной реконструкции и определении пространственных взаимоотношений астроцитов в головном мозге млекопитающих.

Об авторах

Д Э КОРЖЕВСКИЙ

Институт экспериментальной медицины РАМН, Санкт-Петербург

Отдел общей и частной морфологии; Институт экспериментальной медицины РАМН, Санкт-Петербург

О В КИРИК

Институт экспериментальной медицины РАМН, Санкт-Петербург

Отдел общей и частной морфологии; Институт экспериментальной медицины РАМН, Санкт-Петербург

Е Г СУХОРУКОВА

Институт экспериментальной медицины РАМН, Санкт-Петербург

Отдел общей и частной морфологии; Институт экспериментальной медицины РАМН, Санкт-Петербург

А В ГИЛЯРОВ

Институт экспериментальной медицины РАМН, Санкт-Петербург

Отдел общей и частной морфологии; Институт экспериментальной медицины РАМН, Санкт-Петербург

К В СОЛОВЬЕВ

Институт экспериментальной медицины РАМН, Санкт-Петербург

отдел молекулярной генетики; Институт экспериментальной медицины РАМН, Санкт-Петербург

Н А ГРУДИНИНА

Институт экспериментальной медицины РАМН, Санкт-Петербург

отдел молекулярной генетики; Институт экспериментальной медицины РАМН, Санкт-Петербург

Список литературы

  1. Коржевский Д.Э. и Гиляров А.В. Иммуноцитохимическое выявление тканевых антигенов после длительного хранения объектов в метилсалицилате. Морфология, 2008, т. 134, вып. 6, с. 76-78.
  2. Коржевский Д.Э., Григорьев И.П. и Отеллин В.А. Применение обезвоживающих фиксаторов, содержащих соли цинка, в нейрогистологических исследованиях. Морфология, 2006, т. 129, вып. 1, с. 85-87.
  3. Коржевский Д.Э. и Отеллин В.А. Иммуноцитохимическое выявление астроцитов в срезах головного мозга в сочетании с окраской по Нисслю. Морфология, 2004, т. 125, вып. 3, с. 100-102.
  4. Лилли Р. Патогистологическая техника и практическая гистохимия. М., Мир, 1969.
  5. Ромейс Б. Микроскопическая техника. М., Изд-во иностр. лит-ры, 1954.
  6. Феофанов А.В. Спектральная лазерная сканирующая конфокальная микроскопия в биологических исследованиях. Успехи биол. химии, 2007, т. 47, с. 371-410.
  7. Lindig T.M., Kumar V., Kikinis R. et al. Spiny versus stubby: 3D reconstruction of human myenteric (type I) neurons. Histochem. Cell Biol., 2009, v. 131, № 1, p. 1-12.
  8. Periasamy A., Skoglung P., Noakes C. and Keller R. An evaluation of two-photon excitation versus confocal and digital deconvolution fluorescence microscopy imaging in Xenopus morphogenesis. Microsc. Res. Tech., 1999, v. 47, p. 172-181.
  9. Stachs O., Knappe S., Zhivov A. et al. 3D-konfokale Laser-Scanning-Mikroskopie der kornealen epithelialen Nervenstruktur. Klin. Monatsbl. Augenheilkd., 2006, Bd. 223, H. 7, S. 583-588.
  10. Vuksic M., Del Turco D., Bas Orth C. et al. 3D-reconstruction and functional properties of GFP-positive and GFP-negative granule cells in the fascia dentata of the Thy1-GFP mouse. Hippocampus, 2008, v. 18, № 4, p. 364-375.

Дополнительные файлы

Доп. файлы
Действие
1. JATS XML
Скачать

© Эко-Вектор, 2009


СМИ зарегистрировано Федеральной службой по надзору в сфере связи, информационных технологий и массовых коммуникаций (Роскомнадзор).
Регистрационный номер и дата принятия решения о регистрации СМИ: № 0110212 от 08.02.1993.

Данный сайт использует cookie-файлы

Продолжая использовать наш сайт, вы даете согласие на обработку файлов cookie, которые обеспечивают правильную работу сайта.

О куки-файлах