The study of cerebral astrocyte spatial organization using confocal laser microscopy



Cite item

Full Text

Open Access Open Access
Restricted Access Access granted
Restricted Access Subscription or Fee Access

Abstract

Three-dimensional reconstruction of cytoarchitectonic relations of the main components of the nervous tissue appears to be an important, yet an extremely laborious task of neuromorphology. The aims of the present study were: to develop the method permitting accurate visualization of astrocytes in rat brain slices thicker then 30 μm, to create an adequate algorithm for the study of the slides received using a confocal microscope and to perform the three-dimensional reconstructions of astrocytes from Z-series of confocal images. Different variants of slide preparation (various clearing reagents, fluorochromes, mounting media) were investigated, together with the operating modes of confocal microscope, methods of digital image processing etc. The methodical approaches are recommended that may be successfully applied for three-dimensional reconstruction and detection of spatial relations of astrocytes in mammalian brain.

About the authors

D Ye KORZHEVSKIY

RAMS Institute of Experimental Medicine, St. Petersburg

Отдел общей и частной морфологии; Институт экспериментальной медицины РАМН, Санкт-Петербург; RAMS Institute of Experimental Medicine, St. Petersburg

O V KIRIK

RAMS Institute of Experimental Medicine, St. Petersburg

Отдел общей и частной морфологии; Институт экспериментальной медицины РАМН, Санкт-Петербург; RAMS Institute of Experimental Medicine, St. Petersburg

Ye G SUKHORUKOVA

RAMS Institute of Experimental Medicine, St. Petersburg

Отдел общей и частной морфологии; Институт экспериментальной медицины РАМН, Санкт-Петербург; RAMS Institute of Experimental Medicine, St. Petersburg

A V GILIAROV

RAMS Institute of Experimental Medicine, St. Petersburg

Отдел общей и частной морфологии; Институт экспериментальной медицины РАМН, Санкт-Петербург; RAMS Institute of Experimental Medicine, St. Petersburg

K V SOLOVYOV

RAMS Institute of Experimental Medicine, St. Petersburg

отдел молекулярной генетики; Институт экспериментальной медицины РАМН, Санкт-Петербург; RAMS Institute of Experimental Medicine, St. Petersburg

N A GRUDININA

RAMS Institute of Experimental Medicine, St. Petersburg

отдел молекулярной генетики; Институт экспериментальной медицины РАМН, Санкт-Петербург; RAMS Institute of Experimental Medicine, St. Petersburg

References

  1. Коржевский Д.Э. и Гиляров А.В. Иммуноцитохимическое выявление тканевых антигенов после длительного хранения объектов в метилсалицилате. Морфология, 2008, т. 134, вып. 6, с. 76-78.
  2. Коржевский Д.Э., Григорьев И.П. и Отеллин В.А. Применение обезвоживающих фиксаторов, содержащих соли цинка, в нейрогистологических исследованиях. Морфология, 2006, т. 129, вып. 1, с. 85-87.
  3. Коржевский Д.Э. и Отеллин В.А. Иммуноцитохимическое выявление астроцитов в срезах головного мозга в сочетании с окраской по Нисслю. Морфология, 2004, т. 125, вып. 3, с. 100-102.
  4. Лилли Р. Патогистологическая техника и практическая гистохимия. М., Мир, 1969.
  5. Ромейс Б. Микроскопическая техника. М., Изд-во иностр. лит-ры, 1954.
  6. Феофанов А.В. Спектральная лазерная сканирующая конфокальная микроскопия в биологических исследованиях. Успехи биол. химии, 2007, т. 47, с. 371-410.
  7. Lindig T.M., Kumar V., Kikinis R. et al. Spiny versus stubby: 3D reconstruction of human myenteric (type I) neurons. Histochem. Cell Biol., 2009, v. 131, № 1, p. 1-12.
  8. Periasamy A., Skoglung P., Noakes C. and Keller R. An evaluation of two-photon excitation versus confocal and digital deconvolution fluorescence microscopy imaging in Xenopus morphogenesis. Microsc. Res. Tech., 1999, v. 47, p. 172-181.
  9. Stachs O., Knappe S., Zhivov A. et al. 3D-konfokale Laser-Scanning-Mikroskopie der kornealen epithelialen Nervenstruktur. Klin. Monatsbl. Augenheilkd., 2006, Bd. 223, H. 7, S. 583-588.
  10. Vuksic M., Del Turco D., Bas Orth C. et al. 3D-reconstruction and functional properties of GFP-positive and GFP-negative granule cells in the fascia dentata of the Thy1-GFP mouse. Hippocampus, 2008, v. 18, № 4, p. 364-375.

Supplementary files

Supplementary Files
Action
1. JATS XML
Download

Copyright (c) 2009 Eco-Vector


СМИ зарегистрировано Федеральной службой по надзору в сфере связи, информационных технологий и массовых коммуникаций (Роскомнадзор).
Регистрационный номер и дата принятия решения о регистрации СМИ: № 0110212 от 08.02.1993.

This website uses cookies

You consent to our cookies if you continue to use our website.

About Cookies