COMPARATIVE ANALYSIS OF METHODOLOGICAL APPROACHES APPLIED FOR THE SIMULTANEOUS DEMONSTRATION OF SEVERAL ANTIGENS IN IMMUNOHISTOCHEMICAL STUDIES



Cite item

Full Text

Open Access Open Access
Restricted Access Access granted
Restricted Access Subscription or Fee Access

Abstract

In immunomorphological studies, it is often necessary to visualize several antigens simultaneously within the same histological sections. However in practice, the application of double staining is limited due to methodological complexity. The aim of the current study was to reproduce different methods recommended for multiple immunohistochemical staining of one section and to estimate their advantages and drawbacks. Six different methodological approaches for detection of several antigens in one slide were examined. It was found that the method providing the widest resources for analysis was the fluorescent detection, the most convenient was the application of ready-to-use standardized reagents, and the cheapest method was two-color reaction with DAB-type chromogen.

References

  1. Коржевский Д.Э., Гилерович Е.Г., Зинькова Н.Н. и др. Иммуноцитохимическое выявление нейронов головного мозга с помощью селективного маркера NeuN. Морфология, 2005, т. 128, вып. 5, с. 76-78.
  2. Коржевский Д.Э. и Гиляров А.В. Оптимизация метода иммуноцитохимического выявления нестина на парафиновых срезах головного мозга крысы. Морфология, 2006, т. 130, вып. 6, с. 77-79.
  3. Коржевский Д.Э., Григорьев И.П. и Отеллин В.А. Применение обезвоживающих фиксаторов, содержащих соли цинка, в нейрогистологических исследованиях. Морфология, 2006, т. 129, вып. 1, с. 85-87.
  4. Коржевский Д.Э., Ленцман М.В., Кирик О.В. и Отеллин В.А. Виментин-иммунопозитивные клетки конечного мозга крысы после экспериментального ишемического инсульта. Морфология, 2007, т. 132, вып. 5, с. 23-27.
  5. Коржевский Д.Э. и Отеллин В.А. Иммуноцитохимическое выявление астроцитов в срезах головного мозга в сочетании с окраской по Нисслю. Морфология, 2004, т. 125, вып. 3, с. 100-102.
  6. Коржевский Д.Э., Петрова Е.С., Кирик О.В. и Отеллин В.А. Оценка дифференцировки нейронов в эмбриогенезе крысы с использованием иммуноцитохимического выявления даблкортина. Морфология, 2008, т. 133, вып. 4, с. 7-10.
  7. Кривова Ю.С. Барабанов В.М., Савельева Е.С. и Савельев С.В. Нейроэндокринные комплексы в поджелудочной железе нутрии (Myocastor coypus) (иммуногистохимическое исследование). Морфология, 2009, т. 135, вып. 3, с. 59-62.
  8. Саркисов Д.С. Микроскопическая техника: Руководство. М., Медицина, 1996.
  9. Abramova M., Calas A., Thibault J. and Ugrumov M. Tyrosine hydroxylase in vasopressinergic axons of the pituitary posterior lobe of rats under salt-loading as a manifestation of neurochemical plasticity. Neural. Plasticity, 2000, v. 7, № 3, p. 179-191.
  10. Fountaine T.J., Wincovitch S.M., Geho D.H. et al. Multispectral imaging of clinically relevant cellular targets in tonsil and lymphoid tissue using semiconductor quantum dots. Mod. Pathol., 2006, v. 19, p. 1181-1191.
  11. Hsu S.-M. and Soban E. Color modification of diaminobenzidine (DAB) precipitation by metallic ions and its application for double immunohistochemistry. J. Histochem. Cytochem., 1982, v. 30, № 10, p. 1079-1082.
  12. Lan H.Y., Mu W., Nikolic-Paterson D.J. and Atkins R.C. A novel, simple, reliable and sensitive method for multiple immunoenzyme staining: use of microwave oven heating to block antibody crossreactivity and retrieve antigens. J. Histochem. Cytochem., 1995, v. 43, № 1, p. 97-102.
  13. Mokry J., Ehrmann J., Karbanova J. et al. Newly formed blood vessels in neural and non-neual tissues express intermediate filament nestin. Suppl. Folia Medica Cassoviensia. 5th International Symposium on Experimental and Clinical Neurobiology. Stara Lesna, Slovak Republic, 2005, p. 75.
  14. Negoescu A., Labat-Moleur F., Lorimier P. et al. F(ab) secondary antibodies: a general method for double immunolabeling with primary antisera from the same species. Efficiency control by chemiluminescence. J. Histochem. Cytochem., 1994, v. 42, № 3, p. 433-437.
  15. Qi W., Chu J., Zhou D. and Tacha D. Characterization and appli cation of the newly developed rabbit monoclonal antibody to cytokeratin 7 (CK7) for immunohistochemistry. Appl. immonohistochem. molec. morphol., 2009, v. 17, № 3, p. 233- 238.
  16. Soriano E. and Del Rio J.A. Simultaneous immunocytochemical visualization of bromodeoxyuridine and neural tissue antigens. J. Histochem. Cytochem., 1991, v. 39, № 3, p. 255-263.
  17. Wessel G.M. and McClay D.R. Two embryonic, tissue-specific molecules identified by a double-label immunofluorescence technique for monoclonal antibodies. J. Histochem. Cytochem., 1986, v. 34, № 6, p. 703-706.

Supplementary files

Supplementary Files
Action
1. JATS XML
Download

Copyright (c) 2010 Eco-Vector


СМИ зарегистрировано Федеральной службой по надзору в сфере связи, информационных технологий и массовых коммуникаций (Роскомнадзор).
Регистрационный номер и дата принятия решения о регистрации СМИ: № 0110212 от 08.02.1993.

This website uses cookies

You consent to our cookies if you continue to use our website.

About Cookies