СРАВНИТЕЛЬНЫЙ АНАЛИЗ МЕТОДИЧЕСКИХ ПОДХОДОВ, ПРИМЕНЯЕМЫХ ДЛЯ ОДНОВРЕМЕННОГО ВЫЯВЛЕНИЯ НЕСКОЛЬКИХ АНТИГЕНОВ ПРИ ИММУНОГИСТОХИМИЧЕСКОМ ИССЛЕДОВАНИИ



Цитировать

Полный текст

Открытый доступ Открытый доступ
Доступ закрыт Доступ предоставлен
Доступ закрыт Доступ платный или только для подписчиков

Аннотация

В иммуноморфологических исследованиях нередко возникает необходимость одновременного выявления нескольких антигенов в пределах одного гистологического препарата. Однако применение двойного маркирования на практике зачастую ограничено методическими сложностями. Цель настоящей работы состояла в воспроизведении различных приемов, рекомендованных при проведении двойной иммуногистохимической реакции на одном срезе и в оценке их преимуществ и недостатков. Исследованы 6 методических подходов к выявлению нескольких антигенов. Показано, что наиболее широкие возможности для анализа представляют флюоресцентные методики детекции, наиболее удобным является использование готовых стандартизированных реагентов, а самой дешевой - двухцветная реакция с хромогеном на основе диаминобензидина.

Об авторах

А В Гиляров

Научно-исследовательский институтэкспериментальной медицины СЗО РАМН

Лаборатория функциональной морфологии центральной и периферической нервной системы (руков. - д-р мед. наук Д.Э. Коржевский), отдел общей и частной морфологии; Научно-исследовательский институтэкспериментальной медицины СЗО РАМН

О В Кирик

Научно-исследовательский институтэкспериментальной медицины СЗО РАМН

Лаборатория функциональной морфологии центральной и периферической нервной системы (руков. - д-р мед. наук Д.Э. Коржевский), отдел общей и частной морфологии; Научно-исследовательский институтэкспериментальной медицины СЗО РАМН

Д Э Коржевский

Научно-исследовательский институтэкспериментальной медицины СЗО РАМН

Лаборатория функциональной морфологии центральной и периферической нервной системы (руков. - д-р мед. наук Д.Э. Коржевский), отдел общей и частной морфологии; Научно-исследовательский институтэкспериментальной медицины СЗО РАМН

A V Giliarov

O V Kirik

D E Korzhevskiy

Список литературы

  1. Коржевский Д.Э., Гилерович Е.Г., Зинькова Н.Н. и др. Иммуноцитохимическое выявление нейронов головного мозга с помощью селективного маркера NeuN. Морфология, 2005, т. 128, вып. 5, с. 76-78.
  2. Коржевский Д.Э. и Гиляров А.В. Оптимизация метода иммуноцитохимического выявления нестина на парафиновых срезах головного мозга крысы. Морфология, 2006, т. 130, вып. 6, с. 77-79.
  3. Коржевский Д.Э., Григорьев И.П. и Отеллин В.А. Применение обезвоживающих фиксаторов, содержащих соли цинка, в нейрогистологических исследованиях. Морфология, 2006, т. 129, вып. 1, с. 85-87.
  4. Коржевский Д.Э., Ленцман М.В., Кирик О.В. и Отеллин В.А. Виментин-иммунопозитивные клетки конечного мозга крысы после экспериментального ишемического инсульта. Морфология, 2007, т. 132, вып. 5, с. 23-27.
  5. Коржевский Д.Э. и Отеллин В.А. Иммуноцитохимическое выявление астроцитов в срезах головного мозга в сочетании с окраской по Нисслю. Морфология, 2004, т. 125, вып. 3, с. 100-102.
  6. Коржевский Д.Э., Петрова Е.С., Кирик О.В. и Отеллин В.А. Оценка дифференцировки нейронов в эмбриогенезе крысы с использованием иммуноцитохимического выявления даблкортина. Морфология, 2008, т. 133, вып. 4, с. 7-10.
  7. Кривова Ю.С. Барабанов В.М., Савельева Е.С. и Савельев С.В. Нейроэндокринные комплексы в поджелудочной железе нутрии (Myocastor coypus) (иммуногистохимическое исследование). Морфология, 2009, т. 135, вып. 3, с. 59-62.
  8. Саркисов Д.С. Микроскопическая техника: Руководство. М., Медицина, 1996.
  9. Abramova M., Calas A., Thibault J. and Ugrumov M. Tyrosine hydroxylase in vasopressinergic axons of the pituitary posterior lobe of rats under salt-loading as a manifestation of neurochemical plasticity. Neural. Plasticity, 2000, v. 7, № 3, p. 179-191.
  10. Fountaine T.J., Wincovitch S.M., Geho D.H. et al. Multispectral imaging of clinically relevant cellular targets in tonsil and lymphoid tissue using semiconductor quantum dots. Mod. Pathol., 2006, v. 19, p. 1181-1191.
  11. Hsu S.-M. and Soban E. Color modification of diaminobenzidine (DAB) precipitation by metallic ions and its application for double immunohistochemistry. J. Histochem. Cytochem., 1982, v. 30, № 10, p. 1079-1082.
  12. Lan H.Y., Mu W., Nikolic-Paterson D.J. and Atkins R.C. A novel, simple, reliable and sensitive method for multiple immunoenzyme staining: use of microwave oven heating to block antibody crossreactivity and retrieve antigens. J. Histochem. Cytochem., 1995, v. 43, № 1, p. 97-102.
  13. Mokry J., Ehrmann J., Karbanova J. et al. Newly formed blood vessels in neural and non-neual tissues express intermediate filament nestin. Suppl. Folia Medica Cassoviensia. 5th International Symposium on Experimental and Clinical Neurobiology. Stara Lesna, Slovak Republic, 2005, p. 75.
  14. Negoescu A., Labat-Moleur F., Lorimier P. et al. F(ab) secondary antibodies: a general method for double immunolabeling with primary antisera from the same species. Efficiency control by chemiluminescence. J. Histochem. Cytochem., 1994, v. 42, № 3, p. 433-437.
  15. Qi W., Chu J., Zhou D. and Tacha D. Characterization and appli cation of the newly developed rabbit monoclonal antibody to cytokeratin 7 (CK7) for immunohistochemistry. Appl. immonohistochem. molec. morphol., 2009, v. 17, № 3, p. 233- 238.
  16. Soriano E. and Del Rio J.A. Simultaneous immunocytochemical visualization of bromodeoxyuridine and neural tissue antigens. J. Histochem. Cytochem., 1991, v. 39, № 3, p. 255-263.
  17. Wessel G.M. and McClay D.R. Two embryonic, tissue-specific molecules identified by a double-label immunofluorescence technique for monoclonal antibodies. J. Histochem. Cytochem., 1986, v. 34, № 6, p. 703-706.

Дополнительные файлы

Доп. файлы
Действие
1. JATS XML
Скачать

© Эко-Вектор, 2010


СМИ зарегистрировано Федеральной службой по надзору в сфере связи, информационных технологий и массовых коммуникаций (Роскомнадзор).
Регистрационный номер и дата принятия решения о регистрации СМИ: № 0110212 от 08.02.1993.

Данный сайт использует cookie-файлы

Продолжая использовать наш сайт, вы даете согласие на обработку файлов cookie, которые обеспечивают правильную работу сайта.

О куки-файлах