Том 130, № 6 (2006)

Изучали ультраструктурные особенности нейроэндокринных нейронов дорсомедиального ядра (ДМЯ) миндалевидного тела мозга - одной из основных зон полового диморфизма - у 12 крыс линии Вистар с массой тела 250-300 г - у 3 самцов, а также у 9 самок, находящихся на различных стадиях эстрального цикла. У каждого животного, на основании ультраструктурных характеристик, проведен анализ функционального состояния в среднем 50 нейронов ДМЯ. Предложена морфофункциональная классификация, отражающая явления гормонально-зависимых колебаний активности нейронов. Установлено, что нейроны ДМЯ находятся в различных структурно-функциональных состояниях, которые могут быть классифицированы как состояния покоя, умеренной активности, повышенной активности, напряжения (пика активности), возврата в исходное состояние и апоптоза. На стадии эструса выявлено преобладание нейронов в состоянии повышенной активности (40% от общего числа клеток) и пика активности (26%). На стадии метэструса преобладают нейроны в состоянии снижения активности по первому типу (с увеличением содержания гетерохроматина в ядре - 30% клеток); в пике активности и в состоянии повышенной активности находятся 25% и 20% клеток соответственно. В диэструсе нейроны в состоянии покоя, умеренной и повышенной активности, пика активности и снижения активности по первому типу представлены примерно в одинаковых пропорциях (18%, 21%, 18%, 20% и 16% соответственно). У самцов в состоянии повышенной активности и пика активности находятся 35% и 22% нейронов соответственно. Гибель нейронов отмечена только у самцов.

Цель работы - выявить особенности регуляции апоптоза в нейросекреторных центрах старых (в возрасте 18 мес) мышей при воздействии иммуномодулятора интерферона-альфа (ИА) в сравнении с таковой у молодых (2-месячных) мышей. Показано, что возрастная активация апоптоза в супраоптическом (СОЯ) и паравентрикулярном (ПВЯ) ядрах опосредуется различными путями и может быть результатом изменений в соотношении синтеза про- (Bax) и антиапоптотических (Mcl-1, Вс1-2) молекул. Кроме того, сигнальный каскад апоптоза у молодых мышей при действии ИА идентичен в обоих ядрах, тогда как у старых мышей есть различия между СОЯ и ПВЯ.

Исследована локализация чувствительных нейронов крестцовых спинномозговых ганглиев (КСГ), иннервирующих толстую кишку. Наркотизированным уретаном кошкам под серозную оболочку восходящей и нисходящей ободочной кишки, а также прямой кишки вводили раствор пероксидазы хрена. Через 48 ч животных повторно наркотизировали, транскардиально перфузировали, и изготавливали срезы КСГ, которые затем обрабатывали по методике М.Мезулам. Показано, что все исследованные отделы кишки получают афферентную иннервацию от КСГ S|, S|| и S|||. Максимальное количество меченых клеток наблюдалось в ганглии S||. Установлено, что выраженность чувствительной иннервации толстой кишки возрастает по ее длине в краниокаудальном направлении.

С применением количественной иммуногистохимии произведена оценка иммуномодулирующего действия различных видов стрессоров (физических и психоэмоциональных) на тимус растущих экспериментальных животных. Крыс Sprague Dawley в возрасте 21 сут подвергали действию водоиммерсионного стресса или «стресса ожидания» на протяжении 7 сут ежедневно по 5 ч. По окончании последнего сеанса стресса тимус извлекали, взвешивали и обрабатывали общегистологическими и иммуногистохимическими методами (выявление CD3, CD8, ED1, PCNA) с последующим автоматическим анализом изображения. Исследование показало наличие резкой акцидентальной инволюции тимуса в обеих группах экспериментальных животных, которая была более выраженной при действии физического стрессора, чем «чисто» психоэмоционального. Ведущими факторами постстрессовой гипоплазии тимуса явились избыточный апоптоз кортикальных тимоцитов и торможение их пролиферации, но не усиление их транспорта в периферические иммунные органы.

Методом электронной микроскопии изучали цитологический состав панкреатических островков собак. Выявлены 4 типа эндокринных клеток - A, B, D, PP. Преобладающей субпопуляцией островков являются B-клетки. Установлено, что различия в строении A- и B-клеток обусловлены фазами процесса синтеза гормонов. Показано, что в B-клетках секреторные гранулы, содержащие инсулин, имеют кристаллоидное строение, близкое по своей структуре к B-гранулам инсулинсодержащих B-клеток островков человека. В экзокринной паренхиме поджелудочной железы выявлены ацино-инсулярные клетки, содержащие в цитоплазме одновременно B-гранулы и зимоген, присутствие которых, вероятно, указывает на одно из направлений регенерации панкреатических островков.

Цель настоящего исследования состояла в разработке оптимального и простого протокола иммуноцитохимического выявления нестина (одного из белков промежуточных филаментов, часто используемого для маркирования нейральных стволовых клеток) в парафиновых срезах головного мозга крысы, с исключением процедур демаскирования антигена, нарушающих структуру ткани. Изучено влияние фиксации, характера блокирования неспецифического связывания антител, температурного режима и времени инкубации на результаты иммуноцитохимической реакции. На основании полученных результатов, предложен протокол обработки, позволяющий добиться четкого выявления нестина в клетках головного мозга крысы при оптимальном сохранении структуры нервной ткани

В статье дан критический анализ данных литературы последних лет, касающихся роли и значимости стволовых (эмбриональных и прогениторных) клеток в процессах репаративного морфо- и гистогенеза в различных органах организма животных и человека. Обсуждаются возможные негативные последствия использования стволовых клеток с целью стимуляции репаративных гисто- и органогенезов. Обращается внимание на необходимость более осторожного и взвешенного подхода к использованию стволовых клеток для стимуляции восстановительных процессов в организме.