Том 146, № 6 (2014)

Проведен регрессионный анализ связей между изменениями гистологических структур головного мозга (нейронов, нейроглии и микрососудов) и степенью отравления этанолом (по данным о концентрации спирта в крови и моче). Материал получен от 40 трупов мужчин и женщин в возрасте от 20 и 81 года. Показано, что уменьшение диаметра микрососудов в коре больших полушарий мозга и мозжечка и увеличение его в белом веществе, увеличение количества сосудов со стазом, астроцитов с зернистостью цитоплазмы и различных признаков отёка мозга, а также уменьшения количества отростков астроцитов и способности эритроцитов в зоне стаза окрашиваться глицинкрезоловым красным, коррелируют со средней квадратической концентраций этанола (СККЭ) в крови и моче. Это даёт возможность оценить этот показатель при гистологическом исследовании мозга. Наоборот, зная СККЭ, можно судить о наличии определённых гистологических изменений в мозгу.

У крыс линии Вистар (n=4) иммуногистохимическим методом исследовали влияние капсаицина на морфометрические и структурные характеристики нейронов заднего рога серого вещества T II-сегмента спинного мозга (СМ) и второго грудного чувствительного узла спинномозгового нерва (ЧУСН), содержащих кальбиндин (КБ) с молекулярной массой 28 килодальтон. Капсаицин вводили взрослым животным 3-кратно с интервалом 24 ч в суммарной дозе 125 мг/кг, материал брали на 14-е сутки. Введение капсаицина вызвало уменьшение доли КБ-иммунопозитивных (КБ-ИП) нейронов в ЧУСН (на 60%) и в пластинах заднего рога I-II-III (на 8, 18 и 15% соответственно), средние размеры КБ-ИП-нейронов увеличились за счет внутриклеточного отека. В результате деафферентации развивались однотипные морфометрические и структурные изменения КБ-ИП-нейронов как в ЧУСН, так и в заднем роге серого вещества СМ, которые проявлялись центральным хроматолизом, вакуолизацией ядра и цитоплазмы, свидетельствуя о гидропической дистрофии. О необратимости выявленных изменений в нейронах ЧУСН и пластинах I, II и V заднего рога СМ свидетельствовали деформация ядра, лизис ядрышка, уменьшение числа КБ-содержащих нейронов, признаки нейронофагии с образованием остаточных узелков на месте погибших клеток.

У самок крыс линии Вистар (n=25) в возрасте 3, 10, 20, 30 и 60 сут, подвергнутых на 2-е сутки жизни химической деафферентации однократным введением капсаицина с использованием иммуногистохимических и морфометрических методов в каудальном узле блуждающего нерва (КУБН), чувствительных узлах спинномозговых нервов (ЧУСН) определяли локализацию, относительное содержание и морфометрические характеристики нейронов, экспрессирующих NO-синтазу (NOC). Контрольную группу составили крысы (n=25) соответствующего возраста. Результаты свидетельствуют, что в контрольной группе в ЧУСН доля NOС-иммунопозитивных нейронов увеличивалась в первые 10 сут жизни и уменьшалась между 30-ми и 60-ми сутками. В КУБН доля NOС-иммунопозитивных нейронов в онтогенезе значимо не менялась. У животных подопытной группы в ЧУСН и КУБН доля NOС-позитивных нейронов резко снижалась в первые 20 сут жизни. Более выраженное снижение числа NOС-содержащих нейронов отмечалось в ЧУСН по сравнению с таковым в КУБН. Полученные данные свидетельствуют о повреждающем действии капсаицина на NOC-позитивные нейроны, что подтверждает роль NO в механизмах ноцицепции.

Нейропептид Y (НПY)-содержащие волокна и нейроны интрамуральных узлов, а также Y 1-и Y 2-рецепторы НПY выявляли в миокарде у крыс в постнатальном онтогенезе иммуногистохимическими методами. Полученные данные свидетельствуют о возрастных изменениях НПY-опосредованной сердечной иннервации. У новорожденных животных плотность расположения НПY-позитивных волокон была наименьшей и возрастала с момента рождения в течение первых 20 сут жизни. Y 1-и Y 2-рецепторы обнаруживались в сердце у новорожденных и более взрослых животных. Y 1-рецепторы были обнаружены в сердце в коронарных артериях, артериолах, кардиомиоцитах с момента рождения. Плотность расположения Y 2-рецепторов НПY в миокарде юных (до 2 мес жизни) и взрослых крыс (до 1 года) была очень мала, однако значительно возрастала у старых крыс. Все нейроны интрамуральных узлов на протяжении постнатального онтогенеза оставались Y 1-иммунопозитивными и Y 2-иммунонегативными.

Исследована икроножная мышца белых беспородных крыс-самок с 14-х по 180-е сутки после рождения в норме (контрольная группа, n=18), после неонатальной химической деафферентации (n=18), после неонатальной химической десимпатизации (n=18) и сочетанной неонатальной химической денервации (деафферентация плюс десимпатизация, n=18). Контролем служили интактные животные (n=18). Гистохимическими методами выявляли активность холинэстеразы (субстрат-тиоуксусная кислота) и щелочной фосфатазы (субстрат-нафтол AS-BS фосфат). После сочетанной химической денервации по сравнению с контролем отмечались снижение активности холинэстеразы, нивелирование ранней возрастной элиминации нейромышечных синапсов и более низкая доля сложных ферментоактивных зон, позднее формирование сосудистой петли вокруг двигательных окончаний. Сосудистая сеть характеризовалась бóльшим диаметром и преимущественно плоскостной ориентацией сосудов. Формируемая система «мышечное волокно - двигательное окончание - сосудистая сеть» имела низкий адаптационный потенциал и тенденцию к более раннему развитию инволютивных процессов.

Морфометрическими методами исследована динамика количественных показателей выжившей после лазерного повреждения части мозгового вещества надпочечника (МВН) у крыс линии Вистар (n=41) в течение 2 мес. На парафиновых срезах, окрашенных по методу L. H. Honore, изучены объемные доли в МВН и средние площади сечения адреналоцитов и норадреналоцитов, доли кровеносных сосудов, стромы и нейронов. Относительные объемы кровеносных сосудов достигают максимальных значений на 7-е сутки, а хромаффиноцитов - на 28-е сутки эксперимента. Объемные доли стромы и нейронов в ходе опыта значимо не изменяются. По оригинальной методике рассчитаны реальные убыль и прирост объема железистой паренхимы выжившей части МВН. Реальная убыль хромаффиноцитов достигает максимума в 1,5% на 7-е сутки, а максимум их реального прироста в 4,7% наблюдается на 28-е сутки (скорость прироста составляет 1-2,5% в неделю). До 28-х суток в восстановительных процессах преобладает гиперплазия хромаффиноцитов, на 28-е сутки существенный вклад вносит гипертрофия. К 56-м суткам зона выживания МВН нормализуется.

Состояние печени изучено у 13 щенков через 6-12 мес после создания с экспериментальной коарктации аорты, 12 животных с моделью стеноза легочного ствола и 10 контрольных (интактных) собак соответствующего возраста. В работе использованы гистологические, морфометрические методы и иммуногистохимическая реакция с моноклональными антителами кα-SMA. Проведенные исследования показали, что при коарктации аорты возникают гипотония и атрофия стенок артерий, ветвей воротной вены и вен, относящихся к системе печеночной вены. Напротив, при стенозе легочного ствола происходит утолщение стенок последних, развитие веноартериальной и вено-венозной реакций. Несмотря на существенное различие в расстройствах гемодинамики при данных пороках, наблюдается увеличение количества и степени развития адаптационных мышечных структур в приносящем сосудистом русле печени. В выносящем сосудистом русле в условиях коарктации происходит расслабление и атрофия мышечных валиков в венах, относящихся к системе печеночной вены, что сопровождается уменьшением депонирования крови в печени. При стенозе легочного ствола для предотвращения венозного застоя происходит гипертрофия мышечных валиков указанных сосудов. Со временем в сосудах печени при обоих пороках выявляется ангиосклероз; развиваются дегенеративные изменения паренхимы и склероз стромы.

С помощью комплексной методики прижизненного наблюдения двигательной активности цилиарного аппарата в сочетании с гистологическими и морфометрическими методами изучена эпителиальная выстилка трахеи 110 крыс линии Вистар от момента рождения до наступления старости (24 мес). Эпителий трахеи у новорожденных животных характеризуется минимальным содержанием реснитчатых клеток (18%), максимальной частотой биения ресничек (ЧБР - 15 Гц) и отсутствием направленного движения слизи. В течение 1-го месяца жизни отмечен наиболее интенсивный рост количества реснитчатых клеток и их морфометрических параметров (высота клетки, длина ресничек), формирование многорядной структуры эпителия, к концу этого периода появляются морфологически идентифицируемые бокаловидные клетки. Появление мукоцилиарного транспорта (0,03 мм/с) зарегистрировано с 14-х суток после рождения. Эпителий трахеи достигает структурной и функциональной зрелости к 3 мес постнатального развития, в это время скорость движения слизи (СДС) возрастает до 0,1 мм/с. ЧБР у животных в возрасте 6-12 мес составляет 11,3-11,7 Гц. У старых (24 мес) животных ЧБР увеличивается до 12,9 Гц, морфометрические параметры реснитчатых клеток, доля бокаловидных клеток, СДС достигают максимальных значений. Одновременно в эпителиальном пласте снижается содержание базальных (камбиальных) и увеличивается количество гибнущих клеток. Результаты исследования свидетельствуют о тесной взаимосвязи процессов структурной и функциональной дифференцировки реснитчатого эпителия воздухоносных путей, обеспечивающих эффективную работу мукоцилиарного аппарата на протяжении всей жизни.

Обратимую гемодинамическую модель стеноза легочного ствола создавали в опытах на 34 щенках, затем 12 из них подвергали корригирующей операции. Животных обеих групп наблюдали в сроки 6-12 мес. В качестве контроля использовали 12 интактных собак соответствующего возраста. Почки животных всех серий опытов изучали с помощью комплекса гистологических и морфометрических методик. Показано, что сужение легочного ствола приводит к адаптационной и патологической перестройке артерий, вен и клубочков почки. Первые - выражаются в гипертрофически-гиперпластических изменениях гладкой мышечной ткани сосудов почек с утолщением их стенки, сужением просвета артерий и перестройкой части из них по замыкающему типу. Вторые - проявляются склерозом сосудов артериального и венозного русла, коллабированием и склерозом клубочков почки. Обнаружены значимые изменения канальцев и стромы почек: канальцы атрофируются, а строма подвергается склерозу. Все указанные изменения отражают структурное ремоделирование почек. Устранение экспериментального порока запускает механизм регенерации с «обратным» развитием ранее возникших изменений. При этом полного восстановления всех тканевых компонетов почек не происходит.

Целью исследования явилось установление возможности оценки состояния периферического нерва по активности ацетилхолинэстеразы (АХЭ). В результате серии экспериментов на крысах удалось модифицировать способ выявления активности АХЭ на срезах периферических нервов (приоритетная справка № 2013157128 от 23.12.2013 г.) и показать, что интенсивность реакции зависит от состояния волокон. При атрофических процессах активность фермента снижается, а при прорастании волокон - резко возрастает. Доказано, что используя в качестве критерия интенсивность реакции на АХЭ, можно оценить состояние нерва в течение 1-2 ч, что может быть использовано в дальнейшем во время реконструктивных операций (интраоперационно).