Том 143, № 2 (2013)

На 25 взрослых кошках изучены ипсилатеральные ассоциативные связи различных полей первичной сенсорной (С1) и первичной моторной (М1) коры после локальной коагуляции и инфузии пероксидазы хрена. Показано, что распределение ассоциативных волокон полей М1 иС1 соответствует границам соматотопического представительства разных частей тела. Kаждое поле в пределах М1 (4y, 6ab) иС1 (1, 2, 3a, 3b) с различной морфофункциональной организацией не связывается системой ассоциативных волокон, пересекающих цитоархитектонические границы отмеченных выше полей. Первичная сенсорная (С1) и моторная (М1) кора не связаны реципрокно. Единичные волокна связывают соседние поля М1 иС1.

Целью исследования явилась оценка структурных и метаболических изменений в клетках Пуркинье (КП) мозжечка крыс в динамике подпеченочного холестаза. Использованы гистологические, гистохимические и электронно-микроскопические методы. Установлено, что холестаз вызывает прогрессивное нарастание структурных и метаболических нарушений в КП мозжечка с максимумом на 10–20-е сутки, приводящих к гибели и уменьшению их числа. В цитоплазме этих нейронов происходит снижение активности дегидрогеназ: сукцината, NADH, глюкозо-6-фосфата и уменьшение содержания РНК, но активация лактатдегидрогеназы и кислой фосфатазы. Нарушения ультраструктуры клеток Пуркинье включали деструкцию ядра и органелл (особенно митохондрий), что сопровождалось увеличением количества и размеров лизосом и фагосом, увеличением относительного числа свободных рибосом, появлением тесных контактов митохондрий с ядром и органеллами. Через 45–90 сут у выживших животных происходила постепенная нормализация структуры и метаболизма КП мозжечка вследствие самопроизвольного устранения холестаза, по-видимому, в результате образования обходных желчевыводящих путей.

Цель настоящей работы — выяснение возможности приживления и изучение дифференцировки диссоциированных клеток эмбриональных закладок спинного мозга и неокортекса крыс линии Вистар, после их пересадки в седалищный нерв взрослых животных. Суспензию клеток, полученную в результате диссоциации фрагментов шейного отдела спинного мозга и переднего мозгового пузыря плодов крыс 15 сут развития, вводили в проксимальный сегмент предварительно поврежденного седалищного нерва. С помощью иммуногистохимического маркера нейральных стволовых/прогениторных клеток (Msi-1) пересаженные клетки были идентифицированы в нервных стволах через 1 сут после операции. Через 21 сут часть из них дифференцировалась в NeuN-иммунопозитивные нейроны, однако число их было невелико. Большинство клеток в трансплантатах неокортекса, в отличие от трансплантатов спинного мозга, через 21 сут после операции представляли собой эпендимоциты.

Проведено количественное изучение распределения фолликулов по среднему диаметру их сечений на гистологических срезах щитовидной железы (ЩЖ) мышевидных грызунов (25 полевок-экономок, 24 мыши линии CBA, 16 крыс линии Вистар) после хронического воздействия внешнего низкоинтенсивного γ-излучения в природных условиях и в эксперименте (диапазон поглощенных доз 0,05–0,5 Гр). Анализ спектра распределения фолликулов по диаметру сечения в ЩЖ облученных животных демонстрирует универсальную закономерность: по сравнению с необлученными животными наблюдается отчетливое увеличение (в 1,3–1,7 раза) содержания мелких фолликулов (диаметр сечения у исследованных видов животных — ниже 36–41 мкм). Подобный феномен воспроизведен в модельных опытах (регенерация ЩЖ крыс после гемитиреоидэктомии). Наблюдаемое усиление процессов фолликулогенеза при хроническом облучении в малых дозах может быть расценено как неспецифическая адаптивная реакция органа на радиоиндуцированное повреждение паренхимы ЩЖ.

Методом электронной микроскопии изучена висцеральная и париетальная брюшина белых мышей как в процессе онтогенеза, так и при ее повреждении, вызванном введением в полость 0,5% раствора новокаина. На ранних этапах внутриутробного развития (13 сут) большая часть мезотелиоцитов и мезенхимных клеток содержат в цитоплазме в основном свободные рибосомы (полисомы), другие органеллы единичны и расположены вблизи ядерной оболочки. В дальнейшем количество мембранных органелл увеличивается, а полисом — снижается. При повреждении мезотелия через 1 сут по краю раневой поверхности появляются малодифференцированные мезотелиоциты, цитоплазма которых содержит многочисленные полисомы. В этих клетках обнаруживаются выпячивания мембран ядерной оболочки и их связь с мембранными органеллами (эндоплазматическая сеть, комплекс Гольджи, митохондрии). Наблюдаемое взаимоотношение ядерной оболочки с мембранными органеллами цитоплазмы рассматривается как возможный способ их образования в малодифференцированных клетках. Редкая встречаемость данного явления у взрослых животных при патологии и отсутствие его в условиях физиологической регенерации рассматривается как проявление закона гистогенетических рекапитуляций.

Исследованы размеры и объем почек, их абсолютная и относительная масса, а также плотность ткани почек у 50 самцов и самок нутрий разных возрастных групп (1 сут, 2, 4,5, 7,5 мес и 1 год). Установлено, что у самок относительная масса почек с возрастом уменьшается, а у самцов эта тенденция сохраняется только до 7,5 мес жизни. У самок с 1-х суток до 1 года жизни масса и объем правой почки увеличиваются в 11,44 и 11,25 раза, длина и ширина — в 2,16 и 2,59 раза и толщина — в 2,07 раза, а в левой почке соответствующие показатели возрастают в 11,69; 11,04; 2,14; 2,65 и 2,01 раза. У самцов с 1-х суток жизни до 1 года масса и объем правой почки возрастают в 19,49 и 16,14 раза, длина и ширина — в 2,69 и 3,11 раза и толщина — в 2,38 раза, а в левой почке значения данных показателей увеличиваются в 18,52, 16,83, 2,56, 2,98 и 2,72 раза. Наибольшее увеличение изученных показателей почек у самок и самцов нутрий происходит от рождения до 2-месячного возраста. Установлено, что плотность ткани почек имеет максимальные значения в 4,5 мес. В левой и правой почке у самок нутрий соответственно ее значения составили от 1,09±0,03 до 1,12±0,02 г/см 3, а у самцов — от 1,04±0,01 до 1,08±0,02 г/см 3.

Изучена роль серотонина в развитии бледного ядра шва (БЯШ) и динамика изменений его серотонин-синтезирующих нейронов в разные сроки постнатального периода у крыс Вистар в норме и у животных, развивавшихся внутриутробно на фоне дефицита серотонина. Показано, что в БЯШ присутствуют 2 популяции серотонинергических нейронов, различающихся своими морфологическими характеристиками. На начальных этапах постнатального развития (5-е сутки) серотонинсинтезирующими являются только крупные нейроны, синтетическая активность малых нейронов проявляется позднее — к 10-м суткам. С возрастом в норме размер крупных нейронов и их число увеличиваются, что может свидетельствовать о продолжающемся процессе дифференцировки и/или увеличении функциональной нагрузки. Размер и численность малых нейронов с возрастом практически не изменяются. Дефицит серотонина во время пренатального развития приводит к нарушению структурной организации БЯШ. По сравнению с контролем отмечено уменьшение размеров и численности серотонинсинтезирующих нейронов обеих популяций, с возрастом их размер не изменяется. Часть нейронов подвергаются дегенерации, в результате чего сокращается их численность. Наблюдаемые повреждения будут изменять серотонинергическую иннервацию медуллярных ядер, осуществляющих кардиореспираторный контроль и, таким образом, нарушать деятельность сердечно-сосудистой и дыхательной систем.

Представлен анализ результатов собственных данных, полученных при использовании фиксации различных тканей в цинк-этанол-формальдегиде (ЦЭФ). Показано, что фиксация в ЦЭФ в сравнении с другими методами фиксации позволяет добиться более высокой чувствительности иммуноцитохимической реакции для большого числа исследованных антигенов, во многих случаях — отказаться от теплового демаскирования антигенов, обеспечивает высокое качество изображений при использовании флюоресцентной и конфокальной лазерной микроскопии. Однако при исследовании антигенов малой молекулярной массы отмечена диффузия антигена из области его первичной локализации. Полученные данные позволяют заключить, что фиксация материала в ЦЭФ перспективна для применения как в иммуноцитохимических исследованиях, в том числе с использованием флюоресцентной и конфокальной лазерной микроскопии, так и в общегистологической практике.