Том 157, № 1 (2020)

Цель - оценка динамики формирования ГАМК-ергических нейронов в коре и ядрах развивающегося мозжечка белой крысы в постнатальном онтогенезе с помощью иммуногистохимического выявления глутаматдекарбоксилазы (ГДК). Материал и методы. Исследование выполнено на 16 беспородных белых крысах на 2-, 7-, 15-е сутки (ранний постнатальный период) и 45-е сутки после рождения (пубертатный период). Для иммуногистохимического выявления ГАМК-ергических нейронов применяли первичные моноклональные мышиные антитела GAD-67 к ГДК, являющейся ферментом синтеза γ-аминомасляной кислоты. Иммунореактивность ГДК изучали на парафиновых срезах околочервячной части мозжечка. Результаты. Установлено, что в цитоплазме тел всех типов ГАМК-ергических нейронов коры мозжечка ГДК выявлялась уже на 2-е сутки после рождения. В цитоплазме тел грушевидных нейронов (клеток Пуркинье, КП) она достигала максимума на 7-е сутки, а в их дендритах - на 15-е сутки, позднее снова уменьшалась в больших звездчатых нейронах (клетках Гольджи, КГ) - на 45-е сутки. В аксонах звездчатых и корзинчатых нейронов ГДК-иммунореактивность к 45-м суткам становилась значительно выше, они формировали сплетения (корзинки) вокруг тел КП. ГАМК-ергические синапсы выявлялись в коре мозжечка на 7-е сутки и достигали максимального развития на 45-е сутки. В цитоплазме тел некоторых нейронов шаровидного и пробковидного ядер мозжечка у двухсуточных крысят выявлялась умеренная ГДК-иммунореактивность. На 7-е сутки между нейронами обнаруживались ГДК-иммунопозитивные волокна и аксодендритические синапсы, а на телах нейронов - аксосоматические синапсы, число которых возрастало к 45-м суткам. Выводы. Иммуногистохимическое исследование ГДК позволило выявить чёткую динамику постнатальных структурных преобразований тел, отростков и синаптических окончаний ГАМК-ергических нейронов в мозжечке крысы.

Цель - выявить и изучить степень выраженности морфологических изменений структур коркового и мозгового вещества почки на фоне смоделированной билатеральной модели ишемии-реперфузии. Материал и методы. Эксперименты проведены на 50 крысах-самцах линии Вистар массой 180-220 г. Моделирование билатеральной модели ишемии-реперфузии проводилось путем наложения атравматичных зажимов на обе почечные ножки на 40 мин. Через 24 или 72 ч реперфузии проводили оценку выраженности структурных изменений в корковом и мозговом веществе почки с использованием гистологических и морфометрических методик. Измеряли высоту эпителиоцитов в проксимальном и дистальном извитых канальцах нефрона, площадь поперечного сечения почечного тельца, клубочка и капсулярного пространства. Результаты. Полученные морфологические изменения в виде нарушения структурности эпителия как в корковом, так и в мозговом веществе почки на 1-е сутки эксперимента имеют тенденцию к увеличению степени их выраженности. К 3-м суткам эксперимента наиболее выраженные реактивно-деструктивные изменения визуализируются в реабсорбционносекреторных отделах нефрона, которые проявляются в виде снижения высоты эпителиоцитов проксимальных и дистальных канальцев, отслоением их от базальной мембраны и слущиванием. Усугубление схожей морфологической картины происходило в собирательных трубках, в просветах которых определялись конгломераты из отслоившихся от базальной мембраны погибших клеток эпителия. Выявленные реактивно-деструктивные изменения в почках морфологически обосновывают адекватность создания модели ишемии-реперфузии. Выводы. 40-минутная билатеральная ишемия почек с последующей реперфузией в течение 1-3 сут приводит к выраженным структурным изменениям в почках, что соответствует характеристике острого почечного повреждения.

Цель - оценить эффективность реваскуляризации икроножной мышцы крысы в условиях прямой и опосредованной мононуклеарными клетками крови пуповины человека (МККП) доставки в область ишемии рекомбинантного гена ангиогенина (Ang) человека при помощи аденовирусного вектора 5-го серотипа (Ad5). Материал и методы. Исследования проведены на 30 крысах линии Wistar. Через 14 сут после иссечения фрагмента бедренной артерии животным инъецировали в ишемизированную икроножную мышцу генетическую конструкцию (группа Ad5-Ang, n=15). Крысам другой группы (МККП+Ad5-Ang, n=15) в тот же срок трансген доставляли в мышцу при помощи МККП. В группе контроля животным (n=15) вводили в мышцу 0,9 % NaCl в тех же условиях. Через 14 и 28 сут в области ишемии оценивали отношение капилляры/мышечные волокна, количество мышечных волокон и количество мышечных волокон с центральным расположением ядер (МЦЯ). Капилляры идентифицировали по локализации эндотелиальных клеток, выявляемых при помощи иммуногистохимической реакции с антителами против CD31. Результаты. На 14-е сутки после введения МККП+Ad5-Ang показатель отношения количества капилляров к количеству мышечных волокон в области ишемии увеличивается на 57 % (p<0,05). На 28-е сутки в группе МККП+Ad5-Ang и в группе Ad5-Ang значимые различия по данному показателю при сравнении с контрольной группой не выявлены. Количество мышечных волокон на 14-е сутки в группе Ad5-Ang не изменяется, а в группе МККП+Ad5-Ang - уменьшается на 58,4 % (p<0,05). К 28-м суткам этот показатель в группе МККП+Ad5-Ang уменьшается на 95,9 % (p<0,05), а в группе Ad5-Ang - на 197,8 % (p<0,05). Количество МЦЯ существенно увеличивается в обеих экспериментальных группах с применением генетических конструкций на 14-е сутки. Выводы. Введение рекомбинантного гена Ang в область ишемии скелетной мышцы или его доставка в эту область при помощи мононуклеарных клеток крови пуповины стимулирует ангиогенез и постишемическую регенерацию мышечных волокон.

Цель - изучение ультраструктурной картины тканевой рецептивности эндометрия у здоровых женщин и пациенток с репродуктивными неудачами. Материал и методы. Выполнена сканирующая электронная микроскопия поверхностного эпителия эндометрия у 119 пациенток с маточным фактором бесплодия и невынашиванием беременности, обусловленным гипоплазией эндометрия. Исследовали образцы эндометрия, взятые методом pipelle-biopsy (вакуумной аспирации тонким катетером) в период предполагаемого «окна имплантации», соответствующего 7-му дню после овуляции, определяемой по данным мочевого теста, чувствительного к пику концентрации в крови лютеинезирующего гормона (ЛГ7+). Результаты. Ультраструктура поверхностного эпителия имплантационного эндометрия у пациенток с бесплодием характеризуется аплазией и гипоплазией пиноподий (67,39 %), плотными межклеточными контактами (69,53 %), гетероморфностью секреторных клеток (15,22 %) в сочетании с атипией клеток микроокружения (50 %). У пациенток с невынашиванием беременности отмечалось асинхронное развитие пиноподий (46,67 %) и отсутствие разобщения межклеточных контактов в период «имплантационного окна» (84,44 %). Выводы. Выявленные нарушения определяют механизмы нарушения адгезии бластоцисты и инвазии трофобласта на разных стадиях имплантации у пациенток с маточным фактором бесплодия и невынашивания беременности.

Цель - выявление особенностей динамики показателей тотальных размеров тела у студентов с различными соматотипами в возрастном периоде 17-22 года. Материал и методы. Исследование проводили в течение 2010-2018 гг. по результатам проспективных наблюдений показателей тотальных размеров тела у 530 студентов (240 юношей и 290 девушек) 17-22 лет в период их обучения в вузе. Типы телосложения определяли по методу В. Г. Штефко и Б. А. Островского (1929) в изложении С. С. Дарской (1975). Результаты. Среди обследованных студентов у 49,2 % юношей выявлены приросты ДТ, завершившиеся в 21-22 года, и у 35,6 % девушек, продолжающиеся только до 19-20 лет. У большинства студентов за время обучения в вузе отмечены приросты показателей массы тела и окружности груди, при этом также выявлены юноши и девушки, у которых эти показатели не изменились или даже снизились за исследуемый период. На старших курсах у большинства студентов приросты массы тела и окружности груди замедляются с остановкой ростовых процессов, но не прекращаются и ведут к увеличению числа студентов с избыточной массой тела, что подтверждается возрастанием численности молодежи с дигестивным типом телосложения и высокими значениями показателей индекса массы тела (BMI), в большей степени выраженным среди юношей. У студентов с торакальным типом телосложения, который является самым распространенным и динамичным соматотипом в исследуемой выборке, отмечены значимые приросты тотальных размеров тела. Аналогичная динамичность приростов выявлена у юношей с мышечным телосложением. За время обучения в вузе численность молодежи с торакальным типом телосложения снижается, при этом возрастает доля студентов с мышечным и дигестивным соматотипами. За время обучения в вузе у 14,1 % студентов меняется тип телосложения. Выводы. Выявлена обусловленность приростов показателей тотальных размеров тела у юношей и девушек в возрастном периоде 17-22 года типом телосложения, оказывающем влияние на скорость и направленность динамики показателей длины и массы тела и окружности грудной клетки.

Цель - провести сравнительный анализ эффективности технологии непрерывного видеомониторинга и стандартного культивирования эмбрионов человека in vitro. Материал и методы. Проведено исследование 465 развивающихся эмбрионов человека с использованием технологии непрерывного видеонаблюдения. Оценивали морфокинетические параметры (временные промежутки первых дроблений, наличие/отсутствие реверсивного дробления, прямого деления зиготы на три бластомера) и внутриклеточные изменения (мультинуклеация, фрагментация, вакуолизация и др.). Группу контроля составили 512 эмбрионов доимплантационного развития при стандартной методике культивирования. Критериями эффективности были приняты стандартные ключевые показатели развивающихся эмбрионов (уровень оплодотворения, дорастания до бластоцисты, замораживания, коэффициент утилизации, частота наступления клинической беременности). Результаты. Ключевые показатели доимплантационного развития эмбрионов не демонстрируют значительной разницы в группе наблюдения и контрольной. Однако уровень дорастания до бластоцисты, замораживания, коэффициент утилизации эмбрионов в группе с видеомониторингом были несколько выше, так же как и частота наступления беременности - 42,6 % против 38,5 %. Выводы. Технология непрерывного видеомониторинга позволяет снизить неблагоприятное воздействие факторов внешней среды, повышая условия культивирования in vitro. Регистрация ключевых морфодинамических событий и их анализ позволяют более объективно оценивать доимплантационное развитие эмбрионов человека и отбирать на перенос наиболее перспективный к имплантации эмбрион.

В обзоре приводятся новые данные о структуре и функции бронхиолярных экзокриноцитов. Впервые нереснитчатые клетки в бронхиолах были описаны ещё А. фон Кёлликером в 1881 г. Детальное изучение этих клеток в бронхиолах человека и кроликов было проведено М. Клара в 1937 г., в честь которого они были названы. В обзоре обсуждаются следующие функции клеток Клара (КК), или бронхиолярных экзокриноцитов: защитная функция, обусловленная секрецией специфических белков, а также жидкого субстрата, располагающегося на поверхности слизистой оболочки; участие в восстановлении повреждённых реснитчатых клеток в качестве своеобразных стволовых (прогениторных) клеток; функция детоксикации вредных веществ, попадающих в лёгкие, а именно: метаболизация ксенобиотиков и канцерогенных веществ; участие в развитии многих форм рака лёгких, источником формирования которых являются бронхиолярные экзокриноциты, включая аденокарциному - наиболее часто диагностируемую опухоль лёгкого.